| 查看: 1700 | 回复: 9 | |||
redking2012木虫 (正式写手)
|
[交流]
ssDNA的纯化问题
|
|
最近在纯化单链DNA，大概长5k，用qiagen的dna纯化试剂盒纯化之后，得到的产物量相当低。貌似qiagen的试剂盒是专门为双链DNA设计的。请问大家有没有单链DNA的纯化方法或者试剂盒 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有65人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- DNA提取总是降解，核酸定量OD比值异常，帮忙分析一下电泳图
已经有8人回复
- DNA凝胶回收方法及常见问题
已经有1人回复
 本帖仅楼主可见 |
2楼2016-02-27 23:24:06
redking2012
木虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 2446.7
- 散金: 8
- 红花: 1
- 帖子: 449
- 在线: 221.3小时
- 虫号: 1779896
- 注册: 2012-04-26
- 性别: GG
- 专业: 细胞增殖、生长与分化
3楼2016-02-28 04:48:48
oliviashane
新虫 (小有名气)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 254.1
- 帖子: 68
- 在线: 82.8小时
- 虫号: 4172264
- 注册: 2015-10-25
- 专业: 分子与进化生态学
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
redking2012: 金币+5, 有用有帮助 2016-02-28 18:02:30
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
redking2012: 金币+5, 有用有帮助 2016-02-28 18:02:30
| QIAquick PCR产物纯化试剂盒（Qiagen）是可直接纯化扩增后的双或单链PCR产物（100 bp-10 kb），最多纯化得到10微克DNA，达到90-95%的回收率。你的回收率低是有很多原因的，比（1）切入多余凝胶使纯化时琼脂糖凝胶未完全融化。对此建议尽量切掉不含DNA的琼脂糖凝胶，离心纯化柱内最大不要超过400mg琼脂糖凝胶，或者增加温育时间至15分钟，每2分钟混匀一次。（2）制备的琼脂糖凝胶浓度过高。对此建议配制0.8%~1.0%的琼脂糖凝胶进行回收。（3）有乙醇或异丙醇残留，建议增加离心时间或增加静置时间，使乙醇或异丙醇挥发完全。（4）洗脱温度过低或洗脱时间过短。建议在加入无菌超纯水或10 mM Tris·Cl（pH 8.5）后，于37℃温育2分钟。 |
4楼2016-02-28 13:35:21
pennchem
专家顾问 (正式写手)
-
专家经验: +21 - MolEPI: 1
- 应助: 297 (大学生)
- 金币: 10516.5
- 散金: 65
- 红花: 28
- 帖子: 596
- 在线: 1102小时
- 虫号: 2139205
- 注册: 2012-11-21
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学
5楼2016-02-28 14:47:58
redking2012
木虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 2446.7
- 散金: 8
- 红花: 1
- 帖子: 449
- 在线: 221.3小时
- 虫号: 1779896
- 注册: 2012-04-26
- 性别: GG
- 专业: 细胞增殖、生长与分化
6楼2016-03-01 00:41:05
 |
7楼2016-03-01 00:49:31
redking2012
木虫 (正式写手)
8楼2016-03-01 16:02:36
redking2012
木虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 2446.7
- 散金: 8
- 红花: 1
- 帖子: 449
- 在线: 221.3小时
- 虫号: 1779896
- 注册: 2012-04-26
- 性别: GG
- 专业: 细胞增殖、生长与分化
9楼2016-03-05 18:01:51
redking2012
木虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 2446.7
- 散金: 8
- 红花: 1
- 帖子: 449
- 在线: 221.3小时
- 虫号: 1779896
- 注册: 2012-04-26
- 性别: GG
- 专业: 细胞增殖、生长与分化
10楼2016-03-06 17:17:05
