24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1707  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

redking2012

木虫 (正式写手)

[交流] ssDNA的纯化问题

最近在纯化单链DNA,大概长5k,用qiagen的dna纯化试剂盒纯化之后,得到的产物量相当低。貌似qiagen的试剂盒是专门为双链DNA设计的。请问大家有没有单链DNA的纯化方法或者试剂盒

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

redking2012

木虫 (正式写手)

9楼2016-03-05 18:01:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

redking2012

木虫 (正式写手)

3楼2016-02-28 04:48:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

oliviashane

新虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
redking2012: 金币+5, 有用有帮助 2016-02-28 18:02:30
QIAquick PCR产物纯化试剂盒(Qiagen)是可直接纯化扩增后的双或单链PCR产物(100 bp-10 kb),最多纯化得到10微克DNA,达到90-95%的回收率。你的回收率低是有很多原因的,比(1)切入多余凝胶使纯化时琼脂糖凝胶未完全融化。对此建议尽量切掉不含DNA的琼脂糖凝胶,离心纯化柱内最大不要超过400mg琼脂糖凝胶,或者增加温育时间至15分钟,每2分钟混匀一次。(2)制备的琼脂糖凝胶浓度过高。对此建议配制0.8%~1.0%的琼脂糖凝胶进行回收。(3)有乙醇或异丙醇残留,建议增加离心时间或增加静置时间,使乙醇或异丙醇挥发完全。(4)洗脱温度过低或洗脱时间过短。建议在加入无菌超纯水或10 mM Tris·Cl(pH 8.5)后,于37℃温育2分钟。
4楼2016-02-28 13:35:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
redking2012: 金币+3, 有用 2016-02-28 18:03:16
Qiagen有专门纯化单链DNA (M13)的试剂盒
行至水穷处,坐看云起时
5楼2016-02-28 14:47:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 复试调剂,一志愿南农083200食品科学与工程 +4 XQTJZ 2026-03-26 4/200 2026-03-27 01:23 by dgnhs
[考研] 325求调剂 +5 李嘉图·S·路 2026-03-23 5/250 2026-03-27 00:42 by wxiongid
[考研] 351求调剂 +4 麦克阿磊 2026-03-24 4/200 2026-03-27 00:32 by wxiongid
[考研] 一志愿郑州大学,080500学硕,总分317分求调剂 +4 举个栗子oi 2026-03-24 5/250 2026-03-26 23:15 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +6 13831862839 2026-03-24 7/350 2026-03-26 22:57 by 不吃魚的貓
[考研] 325求调剂 +3 Aoyijiang 2026-03-23 3/150 2026-03-26 20:46 by 不吃魚的貓
[考研] 08开头275求调剂 +3 拉谁不重要 2026-03-26 3/150 2026-03-26 20:22 by barlinike
[考研] 07化学280分求调剂 +8 722865 2026-03-23 8/400 2026-03-26 20:00 by 不吃魚的貓
[考研] 340求调剂 +3 Amber00 2026-03-26 3/150 2026-03-26 18:57 by 不吃魚的貓
[考研] 352求调剂 +4 大米饭! 2026-03-22 4/200 2026-03-26 16:40 by 不吃魚的貓
[考研] 考研一志愿苏州大学初始315(英一)求调剂 +3 sbdksD 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:16 by xcjcqu
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[有机交流] 有机合成求助 20+3 FENGSHUJEI 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:31 by 88817753
[考研] 材料292调剂 +8 橘颂思美人 2026-03-23 8/400 2026-03-24 16:33 by laoshidan
[考研] 300求调剂,材料科学英一数二 +5 leaflight 2026-03-24 5/250 2026-03-24 16:25 by laoshidan
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 生物学一志愿985,分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
信息提示
请填处理意见