| 查看: 11578 | 回复: 15 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
切胶回收纯化的DNA浓度太低不能用于连接载体，请教如何提高DNA浓度 已有3人参与
|
||
| 从头说起是这样的，我是使用试剂盒提的核酸，提取后电泳没有条带。后来我用特异性引物进行了扩增，扩增结果不错，条带单一，位置大体也对，但是亮度一般。由于我的核酸不多，现在也就是还有30ul，而每次扩增模板量要2ul，所以今天上午我就把模板稀释了一下，用这个稀释的DNA又进行了扩增，准备回收纯化其中的DNA。可是PCR后电泳的结果不好，比较不亮，但是我坚持进行了切胶回收纯化，使用的是宝生物的盒子，回收后又电泳了一次，这次条带的亮度也就是能刚刚看到的样子，我自己知道这个浓度是不能做往下做连接的。求大神不吝赐教！另外还是有个问题，我发现回收后的条带位置比我PCR扩增的条带的位置更靠上了，这是怎么回事？今天没能拷出来电泳图，如果需要我后续补充。谢谢各位了！！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有139人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 胶回收纯化
已经有0人回复
- 关于PCR产物胶回收连T载的问题～
已经有7人回复
- 质粒酶切后，用DNA纯化试剂盒回收，OD260/230值特别高
已经有0人回复
- PBI121载体酶切后回收
已经有28人回复
- 110bp小片段DNA的酶切后回收纯化问题
已经有11人回复
- 土壤基因组胶回收问题
已经有1人回复
- 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离DNA
已经有8人回复
- DNA凝胶回收方法及常见问题
已经有1人回复
- （侯氏出品）双酶切连接反应之全攻略
已经有89人回复
- 求助高手，我用手提的土壤DNA，用什么方法纯化
已经有11人回复
- 【原创】原创之六：环境样品总DNA的提取与纯化【已搜索无重复】
已经有178人回复
- 【求助/交流】DNA纯化问题
已经有23人回复
- 酶切后胶回收产率太低
已经有2人回复
8楼2016-02-29 09:11:43
kaobo2012
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 100 (初中生)
- 金币: 5426.6
- 散金: 200
- 红花: 15
- 帖子: 731
- 在线: 255.3小时
- 虫号: 1168995
- 注册: 2010-12-13
- 专业: 抗体工程学
2楼2016-02-27 21:16:19
fudan671
木虫 (著名写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 2149.1
- 散金: 335
- 红花: 7
- 帖子: 1343
- 在线: 45小时
- 虫号: 4075866
- 注册: 2015-09-16
- 性别: GG
- 专业: 微生物学
3楼2016-02-27 21:37:18
jackyoung
新虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 3507.7
- 散金: 60
- 红花: 23
- 帖子: 670
- 在线: 91.7小时
- 虫号: 799178
- 注册: 2009-06-26
- 性别: GG
- 专业: 园艺学与植物营养学
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-02-28 10:12:02
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-02-28 10:12:02
|
是提的DNA么？PCR的引物和条件有没有优化？目前这一步只能从提高PCR括增的量方面来优化。 发自小木虫Android客户端 |
4楼2016-02-28 00:15:16
