4.【重要】具有蛋白原核表达、His-tag等亲和纯化、SDS-PAGE、Westernblot、ELISA等实验经验者优先。5.【优先】有nanobody、scFv、Fab、合成抗体、蛋白支架Binder或大规模突变文库构建/筛选...

小鼠源基质金属蛋白酶9（MMP-9）His标签蛋白，即通过将小鼠MMP-9蛋白序列（通常涵盖Ala20-Pro730区域）与C末端的组氨酸标签（His-tag）融合表达于哺乳动物细胞表达系统（如HEK293细胞）而...

生物素化人源IL-15受体α（IL-15Rα）His&Avi标签重组蛋白，即通过将人IL-15Rα胞外结构域（通常涵盖Ile31-Thr205区域）与C端的组氨酸标签（His-tag）及Avi标签（Avi-tag）融合表达，再借助...

高效纯化特性：C端或N端融合的6×His标签可与镍离子亲和层析柱高效结合，实现一步法高纯度蛋白纯化，回收率可达90%以上。2.活性保持良好：重组表达系统可产生具有完整酶学活性的CathepsinF...

Li-TingYang1,TuersunayiAbudureheman1,Wei-WeiZheng1,HangZhou1,JingChen2,Cai-WenDuan3,Kai-MingChen4AnovelHis-tag-bindingaptamerforrecombinantproteindetectionandTcell-...

亲和标签就像蛋白质的"磁铁"，能特异性吸附到特定材料上His-tag：最经典款！小巧轻便，使用广泛GST：个头稍大，但提纯效果一流FLAG/HA：迷你小标签，几乎不影响蛋白本身2.荧光标签让蛋白质...

1??His-tag系统：简单又实惠的“大众选择”His-tag系统靠的是蛋白质上的组氨酸标签和金属离子（比如镍或钴）的亲和作用来纯化蛋白质。组氨酸标签一般是6个连续的组氨酸残基，能和金属离子...

已熟练掌握的技术：（1）细胞相关：瞬转、稳转、细胞周期检测（流式）、细胞凋亡检测（流式）、sphere干性实验、平板克垄cellviability（CCK8）（2）分子相关：分子克垄蛋白纯化（His-Tag、...

随着分子生物学、结构生物学、基因组学等研究的不断深入，人们意识到仅仅依靠...策略1：WB或者anti-his的抗体检查His是否表达，上游构建，改变his-tag的位（C-terminalorN-terminal），必要...

策略1：WB或者anti-his的抗体检查His是否表达，上游构建，改变his-tag的位（C-terminalorN-terminal），必要时增加his个数（常用6-10个）；策略2：孵育的时间不够，降低流速和增加孵育的...

常见的分子量较小的标签有His-Tag、Flag-Tag、HA-Tag、Myc-Tag，这些标签只有几个氨基酸，有很多商品化的抗体，用这些Tag主要用来节省成本，也节约大家制备单抗所需的时间。而大分子的蛋白...

HIS标签His标签是当前最为热门的标签蛋白之一。His6是指六个组氨酸残基组成的融合...SNAP-Tag?SNAP-Tag是从人的O6－甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移（O6-alkylguanine-DNA-alkyltransferase）获得。...

在BL21(DE3)中诱导表达，菌体总蛋白中WB能检测到目的蛋白与预期相符，而用6×HIS-Tag抗体去检测，出现的条带在55KD。其他地方没有条带。问题出在哪里？是抗体质量的问题吗？

除了镍柱层析有用过磁珠纯化的吗效果咋样

目前正在做蛋白纯化，质粒用的是pET28a，由于该质粒自带His-tag，所以重组质粒构建成功后，表达出来的蛋白不管是杂蛋白还是目的蛋白，几乎全部带着His-tag，用Ni柱进行蛋白纯化后，得到低...

提了一个蛋白70kd左右，带his标签，质粒是购买的，用文献中的做法完全提不出来，用wb验证有蛋白条带，但是没有his标签的条带。...还是不上柱换了一个标签，用的flag-tag标签，也是不上柱，整个...

构建pET29a原核表达载体时，只需要构建目的基因和6×his的融合蛋白，因此用Nde1和Xho1把S-tag和thrombinsite也切掉了，通过同源重组把目的基因重组到pET29a，这时候表达蛋白就多了一个ATG，...

我是将一个目的基因片段（来自古生菌，蛋白分子量83kD）插入到pET-20b（+）的载体中，并在大肠BL21中表达，在构建的基因序列末端添加了His-tag标签（如上图），我将细胞破碎，离心的上清液...

不能，必须在His标签两边至少同时加两个核苷酸，而不是His-tag重复序列的一部分。或者，用组氨酸密码子CAC和CAT布置His标签，打破这个重复序列。应尽量避免重叠区域末端为重复序列。14无缝...

由于还没有制备抗体，所以用his-tag标签抗体检测的，结果在41KD和36KD左右都出现了带。41KD的带更粗些，而且通过SDSPAGE跑诱导表达的小时样时趋势更正确。不知道哪条带是我的蛋白了～求大神...

我们这边需要切除一个蛋白的C端His，之间加入了tev位点。我为了节约时间，希望通过反挂后，再洗柱，通过看能挂上去的目的蛋白量来判断酶切程度。而别人建议我改造一下，在His后加上FC以增大...

关于杆状病毒表达系统的一些问题...表达后，菌液高压破碎后特别稠，堵柱子，流过液中也有目的蛋白（带6个His-tag），感觉不挂柱，纯化的时候洗了好多梯度，蛋白还是很杂。小白入门，求大神指点

打算用组氨酸标签来纯化重组蛋白，不知道哪个产家的试剂盒好用，求介绍，谢谢

用酵母做重组，表达融合蛋白约9.7K，属于分泌型表达，含His-tag，取上清10倍浓缩后进行Tri-sds-page电泳跑胶，出现目地条带，且看起来表达量还可以。上清10ml用PBS透析后上Ni柱，跑胶，结果...

用酵母做重组，表达融合蛋白约9.7K，属于分泌型表达，含His-tag，取上清10倍浓缩后进行Tri-sds-page电泳跑胶，出现目地条带，且看起来表达量还可以。上清10ml用PBS透析后上Ni柱，跑胶，结果...