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有什么常规的方法来验证C端His-tag的切除
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我们这边需要切除一个蛋白的C端His，之间加入了tev位点。 我为了节约时间，希望通过反挂后，再洗柱，通过看能挂上去的目的蛋白量来判断酶切程度。 而别人建议我改造一下，在His后加上FC以增大这个蛋白的大小，之后通过跑胶确定酶切程度。 他们给出的理由是有些蛋白也会跟Ni柱非特异性结合，这样就无法判断蛋白是否被酶切和酶切的程度。 目前想知道还有没有更好的方法来判断和验证这个酶切的结果，感谢！ |
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