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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » His标签重组蛋白的检测结果难以解释
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反对派

银虫 (正式写手)

[交流] His标签重组蛋白的检测结果难以解释

请教：pet28a连上一个90kd的蛋白基因后，测序和阅读框都正确。在BL21(DE3)中诱导表达，菌体总蛋白中WB能检测到目的蛋白与预期相符，而用6×HIS-Tag抗体去检测，出现的条带在55KD。其他地方没有条带。问题出在哪里？是抗体质量的问题吗？
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1楼 2022-09-10 10:16:52
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爆炒小木虫

新虫 (小有名气)
★
反对派: 金币+1, 好像没有那么简单 2022-09-11 21:41:42
降解了

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2楼2022-09-10 14:50:13
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反对派

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 爆炒小木虫 at 2022-09-10 14:50:13
降解了

降解，也不可能都降解完了啊。我的his在N端，目标蛋白有完整分子量的带。而且转空质粒的菌体总蛋白也有His的带，而且与我转重组质粒的带在同一位置。
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3楼2022-09-11 21:41:08
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爆炒小木虫

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
反对派: 金币+1 2022-09-17 09:37:31
那就要优化一下，翻译一半停了。建议换标签

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4楼2022-09-15 00:01:45
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科研happy

新虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
会不会蛋白有异构体

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5楼2024-09-04 23:30:32
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