毕赤酵母分泌表达蛋白的话，大约多长时间能开始大量表达啊？我用的是BMG来培养酵母，BMM来诱导蛋白诱导后，可以离心，然后再加入BMM培养液继续诱导分泌吗？

酵母表达实验小白一个，现做一个毕赤酵母表达试验步骤如下：挑单菌落―到指型瓶活化（BMGY）―培养大概18-20h―离心转入三角瓶(BMGY,100/1000ml）...快要到瓶颈，破胞过柱跑电泳发现目标蛋白少...

请教各位前辈一个问题，请问如果一个蛋白是含信号肽的分泌型蛋白，那么可以去掉蛋白的信号肽与酵母胞内表达载体相连，在酵母胞内表达吗？谢谢大家。天使托

最近在做毕赤酵母表达外源蛋白，序列已经知道，但是看文献要在C端和N端分别加c-mycepitope6xHis和α-factor，N端分泌到胞外会切去信号肽，但是C端序列怎么切除呢，请有经验的给予指导:...

甲醇营养型毕赤酵母经诱导80小时左右放罐，板框过滤以后出现蛋白质降解的现象，请问是什么原因？

大家好，本人在表达蛋白上停滞不前，之前用Ecoli表达目的蛋白，全在包涵体里。转为毕赤酵母表达，结果试了两次还是感觉没有表达出来，选用的是分泌性。附上我24h的图，最右边是x33空载作为...

我的蛋白在毕赤酵母GS115mut+中表达，大小在37kda左右，利用BMMY进行蛋白诱导，甲醇浓度为0.5%，诱导48h72h后进行检测，发现上清中没有我要的蛋白，但是在沉淀中出现了45kda左右的条带,这是...

求助大家，想要两个基因到入毕赤酵母进行表达，实验室没有基础，想求助以下问题1.质粒线性化内切酶的选择：按照文献上选择，质粒1内切酶在5AOX1位点酶切，质粒2在5AOX1+目的基因酶切。是否...

最近在做毕赤酵母表达蛋白，现在已经成功转化了GS115菌株，并且PCR鉴定出了目的片段整合进了酵母基因组里，所附的图就是鉴定的结果图。大一点的带是AOX1基因，小一点的带是我连的目的基因。...

最近在做毕赤酵母表达蛋白，现在已经成功转化了GS115菌株，并且PCR鉴定出了目的片段整合进了酵母基因组里，所附的图就是鉴定的结果图。大一点的带是AOX1基因，小一点的带是我连的目的基因。...

做毕赤酵母表达好长时间了，从表达载体的构建到连接、转化、筛选、鉴定，现在开始用甲醇诱导，但是测酶活一直没有，跑SDS-PAGE在预计的片段位置有条带（因为外缘表达，蛋白含量低），因为...

本人刚开始做实验，毕赤酵母用甲醇诱导表达的蛋白在培养基中，应该怎样提纯，蛋白加了His-tag标签，用镍和层析怎样处理培养基？求镍和层析的具体纯化步骤。

请问各位大佬，毕赤酵母表达上清可以通过冻干浓缩，用水复溶，然后过Ni柱吗？

请问各位大佬，毕赤酵母表达上清可以通过冻干浓缩，用水复溶，然后过Ni柱吗？

请问各位大佬，毕赤酵母表达上清可以通过冻干浓缩，用水复溶，然后过Ni柱吗？

用毕赤酵母胞内表达蛋白怎么破胞？超声还是高压？参数多少呢?谢谢回复

从细菌中克隆得到了一个目的基因呢，进行了密码子优化后与质粒pic9k连接，转化毕赤酵母GS115后蛋白并没有分泌表达，请问有人遇到过这种问题吗？求助，万分感激，谢谢！

刚做完电转化时诱导表达，有一条很深的带，还有其他的小的杂带。然后菌种保存甘油菌以后，再诱导表达蛋白杂带就变多了。

毕赤酵母表达蛋白，将重组质粒电转化进入GS115后，用了浓度为1.5的G418遗传霉素筛选后，挑菌裂解，用3AOX1和自己基因的上游引物跑PCR，除了我要的目的片段外，怎么还有一条100的片段啊？...

bp）转到毕赤酵母X33中去，挑取阳性克隆,测出酶活正常，电泳条带正常（29KD）。...而我将蛋白进行浓缩的时候发现10KD根本起不到浓缩的作用，29KD的蛋白都漏过去了，而酵母自身表达的蛋白却可以...

在工厂做过几年大肠杆菌发酵生产氨基酸(基础无菌操作发酵调控什么的都还可以)，现在要做毕赤酵母表达一系列蛋白质，请各位大神告知我需要学习什么知识或者学习什么书本，能胜任这份工作，...

最近刚开始最真核表达蛋白质的实验，发现目的基因的信号肽在16位，就是第46、47、48个碱基。那应该怎么设计引物呢？软件推荐的引物没有刚好从49个碱基开始的？要怎么设计才能刚刚好从49个...

https://d.wanfangdata.com.cn/periodical/swhxyswwlxb200302010信号肽序列对毕赤酵母表达外源蛋白质的影响...

杨楠重组人血清白蛋白在组成型毕赤酵母中重组表达及中试工艺研究吉林大学药学院20141-690...uniplatform=NZKPT&language=CHS

各位大神，我用毕赤酵母表达外源蛋白，从平板上挑菌，小量表达，SDS能看见条带。可是将平板重新划了几次后，完全没有条带，就连野生型的也没有条带了，求大神指点