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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 毕赤酵母表达蛋白
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WOQJR1994

新虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母表达蛋白 已有1人参与

酵母表达实验小白一个，现做一个毕赤酵母表达试验步骤如下：

挑单菌落
―到指型瓶活化（BMGY）
―培养大概18-20h
―离心转入三角瓶(BMGY, 100/1000ml）
―培养至OD=（2-6）
―转入BMMY三角瓶（400/2000ml）
―24h后加入甲醇诱导（重复三次）
三角瓶都是用8层纱布封口，
（发现产生很多泡沫，快要到瓶颈，破胞过柱跑电泳发现目标蛋白少得可怜）
1,泡沫产生是因为通气量不好吗？
2,那么多的泡沫是不是非常容易染菌？
3,是泡沫对蛋白表达有影响吗？
4,怎么样改进试验方案好呢？
真真试验小白一个，老师忙着修改博士论文没空理我，所以求助各位虫友

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1楼 2018-06-14 17:58:21
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WOQJR1994

新虫 (小有名气)
摇床280/30摄氏度

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2楼2018-06-14 18:01:09
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
280 rpm太高了，摇床快要疯了，我顶多用180。
赞一下(1人) 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2018-06-15 01:53:35
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WOQJR1994

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2018-06-15 01:53:35
280 rpm太高了，摇床快要疯了，我顶多用180。

180rmp会不会通气量不好啊

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4楼2018-06-15 09:28:12
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匿名

用户注销 (初入文坛)
snoopytbw: 请正确应助哦。你这个不算应助回帖的 2018-08-07 08:39:25
本帖仅楼主可见
赞一下
5楼2018-08-06 21:04:42
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never1997

禁虫 (初入文坛)
★ ★
snoopytbw: 金币+2, 热心应助，鼓励 2018-08-07 08:39:37
本帖内容被屏蔽
6楼2018-08-07 01:13:01
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