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WOQJR1994

新虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母表达蛋白 已有1人参与

酵母表达实验小白一个,现做一个毕赤酵母表达试验步骤如下:

挑单菌落
―到指型瓶活化(BMGY)
―培养大概18-20h
―离心转入三角瓶(BMGY, 100/1000ml)
―培养至OD=(2-6)
―转入BMMY三角瓶(400/2000ml)
―24h后加入甲醇诱导(重复三次)
三角瓶都是用8层纱布封口,
(发现产生很多泡沫,快要到瓶颈,破胞过柱跑电泳发现目标蛋白少得可怜)
1,泡沫产生是因为通气量不好吗?
2,那么多的泡沫是不是非常容易染菌?
3,是泡沫对蛋白表达有影响吗?
4,怎么样改进试验方案好呢?
真真试验小白一个,老师忙着修改博士论文没空理我,所以求助各位虫友

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WOQJR1994

新虫 (小有名气)

2楼2018-06-14 18:01:09
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

280 rpm太高了,摇床快要疯了,我顶多用180。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2018-06-15 01:53:35
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WOQJR1994

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2018-06-15 01:53:35
280 rpm太高了,摇床快要疯了,我顶多用180。

180rmp会不会通气量不好啊

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4楼2018-06-15 09:28:12
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匿名

用户注销 (初入文坛)

snoopytbw: 请正确应助哦。你这个不算应助回帖的 2018-08-07 08:39:25
本帖仅楼主可见
5楼2018-08-06 21:04:42
已阅   申请MicEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

never1997

禁虫 (初入文坛)

★ ★
snoopytbw: 金币+2, 热心应助,鼓励 2018-08-07 08:39:37
本帖内容被屏蔽

6楼2018-08-07 01:13:01
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