应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » 小麦DNA提取
111/1返回列表
查看: 1910  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

15836073150

金虫 (小有名气)

[交流] 小麦DNA提取

请问大家都是用什么方法提取小麦的DNA的，我用的CTAB法提取的总是浓度很低，请问大家都是怎么提取的，可以交流一下吗。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2016-02-24 10:14:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

15836073150

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by nannan8666 at 2016-02-24 20:10:47
你试试大量法，小麦研磨要充分，研磨不充分浓度会低，

我用的就是大量提取法，这是我的提取步骤，你看有哪需要改进的地方，
1.取材料0.5g研磨
2.将研磨好的材料放入预冷的10ml管中，加入约4ml的CTAB，于65摄氏度温浴1h，每隔10min颠倒混匀一次。
3.冷却至室温，加等体积的24:1，混匀，12000r/min，15min
4.取上清加等体积的24:1，混匀，12000r/min，15min
5.取上清加等体积的无水乙醇（-20摄氏度）混匀，-20摄氏度放置一小时，12000r/min，10min
6.弃上清，加70%的乙醇，12000r/min，10min，可清洗两次
7.干燥5min，加约100ul双蒸水溶解（约15min），加1%的RNA酶。37摄氏度温浴1h
8.再一次24:1抽提混匀，12000r/min，15min
9.取上清，加2倍体积无水乙醇（-20摄氏度）-20摄氏度放置一小时，12000r/min，10min
10.弃上清，所得DNA用75%乙醇清洗3次，晾干加超纯水50ul，溶解DNA，于-20备用。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2016-02-25 09:57:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nannan8666

新虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 15836073150 at 2016-02-25 09:57:14
我用的就是大量提取法，这是我的提取步骤，你看有哪需要改进的地方，
1.取材料0.5g研磨
2.将研磨好的材料放入预冷的10ml管中，加入约4ml的CTAB，于65摄氏度温浴1h，每隔10min颠倒混匀一次。
3.冷却至室温，加等 ...

研磨要用液氮，材料用1g试试，用2X的CTAB
1.研磨完的材料加5ml的ctab在65。c水浴，一个小时，期间晃一下
2，水浴后稍冷却离心10000r的10min
3. 提取上清液加入等体积的酚和氯仿（氯仿：异戊醇=24:1）酚和氯仿的体积为1:1
混匀后离心15min
4离心后上清加入等体积的氯仿，摇匀后再离心10min，离心后加入2倍体积的预冷无水乙醇，然后醇沉1h，离心气干。
4，水溶dna，加0.5ml的18.2的水.抽打混匀，去rna，之后抽提！方法如上！最后气干融于50uTE即可

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2016-02-25 11:03:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

niuminjie

新虫 (初入文坛)
★
15836073150(金币+1): 谢谢参与
我们也是CTAB法，感觉浓度还可以呢

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2016-02-24 13:54:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoding095

新虫 (初入文坛)
★
15836073150(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
2楼: Originally posted by niuminjie at 2016-02-24 13:54:27
我们也是CTAB法，感觉浓度还可以呢

你用的是试剂盒？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-02-24 14:20:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

niuminjie

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaoding095 at 2016-02-24 14:20:34
你用的是试剂盒？
...

不是试剂盒，我们提的小麦叶片基因组DNA，附CTAB配方，提取步骤应该都差不多，网上都有哈！
小麦DNA提取



发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2016-02-24 14:25:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

15836073150

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by niuminjie at 2016-02-24 13:54:27
我们也是CTAB法，感觉浓度还可以呢

这是我的提取步骤，请问还有哪需改进。您的提取步骤可以参考一下吗。
赞一下 回复此楼
5楼2016-02-24 16:40:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nannan8666

新虫 (正式写手)
★
15836073150(金币+1): 谢谢参与
你试试大量法，小麦研磨要充分，研磨不充分浓度会低，

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
6楼2016-02-24 20:10:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

woshiyuminyu

新虫 (正式写手)
★
15836073150(金币+1): 谢谢参与
ctab

发自小木虫Android客户端
回复此楼
8楼2016-02-25 10:10:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mdx1215

新虫 (初入文坛)
试剂盒吧
回复此楼
11楼2016-03-22 15:57:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
yuzhuce10楼
2016-02-26 19:14   回复  
15836073150(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 15836073150 的主题更新
111/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 药学305求调剂 +8 玛卡巴卡boom 2026-04-10 8/400 2026-04-12 00:07 by zhouwenxian
[考研] 求调剂，985材料与化工348分 +7 涵竹刘 2026-04-11 9/450 2026-04-11 23:13 by 溪涧流水
[考研] 291分调剂 +5 上岸小莹加油 2026-04-09 6/300 2026-04-11 21:06 by 逆水乘风
[考研] 求调剂 +11 翩翩一书生 2026-04-09 11/550 2026-04-11 19:57 by 逆水乘风
[考研] 22408 352分求调剂 +4 努力的夏末 2026-04-09 4/200 2026-04-11 10:42 by maddjdld
[考研] 化学工程调剂289 +43 yang婷 2026-04-07 49/2450 2026-04-11 10:37 by 紫曦紫棋
[考研] 材料工程085601，270求调剂 +30 @ASDF1234 2026-04-08 32/1600 2026-04-11 10:30 by Delta2012
[考研] 0854调剂 +8 950824he@ 2026-04-09 8/400 2026-04-11 10:11 by zhq0425
[考研] 346，工科求调剂 +3 moser233 2026-04-09 3/150 2026-04-11 10:04 by zhq0425
[考研] 083200 305分 求二轮调剂 不接受跨专业 +9 Claireyyyy 2026-04-09 10/500 2026-04-10 21:21 by Claireyyyy
[考研] 296求调剂 +6 汪！？！ 2026-04-08 6/300 2026-04-10 11:02 by mattzhming
[考研] 一志愿双非085400电子信息344 求调剂，对材料和化学方向也感兴趣 +8 无情的小羊 2026-04-09 9/450 2026-04-10 09:30 by 松花缸1201
[考研] 材料化工总分334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 20:19 by maddjdld
[考研] 368化学求调剂 +13 wwwwabcde 2026-04-07 14/700 2026-04-09 14:47 by heaven_jay
[考研] 一志愿南京航空航天大学 材料与化工329分求调剂 +11 Mr. Z 2026-04-05 12/600 2026-04-08 16:15 by luoyongfeng
[考研] 344求调剂 +11 魏子per 2026-04-07 11/550 2026-04-07 23:01 by JourneyLucky
[考研] 材料调剂 +13 汉123456 2026-04-07 14/700 2026-04-07 22:53 by 来看流星雨10
[考研] 生物工程求调剂 +13 喜欢还是不甘心 2026-04-05 13/650 2026-04-07 16:55 by Ecowxq666！
[考研] （调剂）一志愿报考哈尔滨工业大学0857资源与环境专业378分考生 +7 狠狠加油 2026-04-05 8/400 2026-04-06 16:52 by momo皓
[考研] 362求调剂一志愿中国石油大学 +4 我要考大 2026-04-06 6/300 2026-04-06 14:11 by 无际的草原
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭