24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (4350)
>文献求助 (251)
>导师招生 (237)
>博后之家 (225)
>论文投稿 (206)
>虫友互识 (157)
>硕博家园 (81)
>有机交流 (80)
>考博 (69)
>招聘信息布告栏 (44)
>学术会议 (35)
>休闲灌水 (31)
>基金申请 (20)
>找工作 (18)
>考研 (15)
>SciFinder/Reaxys (13)

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

15836073150

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1179.2
帖子: 73
在线: 73.4小时
虫号: 4198912

[交流] 小麦DNA提取

请问大家都是用什么方法提取小麦的DNA的，我用的CTAB法提取的总是浓度很低，请问大家都是怎么提取的，可以交流一下吗。

回复此楼

» 猜你喜欢

新审查指南堵死了"一案双申"的老路，实用新型和发明只能二选一了？已经有27人回复
课题快结题了才发现没东西可申请专利？四个维度帮你挖一挖已经有22人回复
植物学论文润色/翻译怎么收费? 已经有159人回复
论文投出去之前到底要不要先申请专利？被审稿周期坑过一次后的复盘已经有8人回复
横向课题结题时企业突然问专利归谁，合同里没约定的话默认算谁的？已经有22人回复
教师节聊点实在的：很多老师的专利正在悄悄失效已经有21人回复
第一次独立答复专利审查意见，才发现这活跟毕业答辩是一个套路已经有24人回复
使用QE质谱仪检测杂质含量已经有0人回复
帮学院整理搁置专利清单时发现一半快到年费期，聊聊几条盘活的路子已经有18人回复
师弟论文见刊大半年才想起来申请专利，还能抢救一下吗？已经有2人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2016-02-24 10:14:51

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

15836073150

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1179.2
帖子: 73
在线: 73.4小时
虫号: 4198912

引用回帖:

6楼: Originally posted by nannan8666 at 2016-02-24 20:10:47
你试试大量法，小麦研磨要充分，研磨不充分浓度会低，

我用的就是大量提取法，这是我的提取步骤，你看有哪需要改进的地方，
1.取材料0.5g研磨
2.将研磨好的材料放入预冷的10ml管中，加入约4ml的CTAB，于65摄氏度温浴1h，每隔10min颠倒混匀一次。
3.冷却至室温，加等体积的24:1，混匀，12000r/min，15min
4.取上清加等体积的24:1，混匀，12000r/min，15min
5.取上清加等体积的无水乙醇（-20摄氏度）混匀，-20摄氏度放置一小时，12000r/min，10min
6.弃上清，加70%的乙醇，12000r/min，10min，可清洗两次
7.干燥5min，加约100ul双蒸水溶解（约15min），加1%的RNA酶。37摄氏度温浴1h
8.再一次24:1抽提混匀，12000r/min，15min
9.取上清，加2倍体积无水乙醇（-20摄氏度）-20摄氏度放置一小时，12000r/min，10min
10.弃上清，所得DNA用75%乙醇清洗3次，晾干加超纯水50ul，溶解DNA，于-20备用。