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15836073150

金虫 (小有名气)

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[交流] 小麦DNA提取

请问大家都是用什么方法提取小麦的DNA的，我用的CTAB法提取的总是浓度很低，请问大家都是怎么提取的，可以交流一下吗。

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1楼 2016-02-24 10:14:51

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nannan8666

新虫 (正式写手)

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引用回帖:

7楼: Originally posted by 15836073150 at 2016-02-25 09:57:14
我用的就是大量提取法，这是我的提取步骤，你看有哪需要改进的地方，
1.取材料0.5g研磨
2.将研磨好的材料放入预冷的10ml管中，加入约4ml的CTAB，于65摄氏度温浴1h，每隔10min颠倒混匀一次。
3.冷却至室温，加等 ...

研磨要用液氮，材料用1g试试，用2X的CTAB
1.研磨完的材料加5ml的ctab在65。c水浴，一个小时，期间晃一下
2，水浴后稍冷却离心10000r的10min
3. 提取上清液加入等体积的酚和氯仿（氯仿：异戊醇=24:1）酚和氯仿的体积为1:1
混匀后离心15min
4离心后上清加入等体积的氯仿，摇匀后再离心10min，离心后加入2倍体积的预冷无水乙醇，然后醇沉1h，离心气干。
4，水溶dna，加0.5ml的18.2的水.抽打混匀，去rna，之后抽提！方法如上！最后气干融于50uTE即可

发自小木虫IOS客户端