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杂带较多，如何处理 已有7人参与
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我现在对温度进行考察，40个循环，温度高条带不好，温度低杂带太多，问大神如何处理？总50ul，引物各2ul（20uM），模板4ul，水17ul，混合物25ul。我需要对引物和模板进行调整吗？变性94℃，延伸72℃，退火在39-45之间。 发自小木虫Android客户端 |
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6楼2016-01-24 18:47:31
7楼2016-01-25 13:44:22
曾文正公
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14楼2016-01-25 23:46:37
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2016-01-24 17:05:41, 475.89 K
3楼2016-01-24 17:06:00
4楼2016-01-24 17:08:10
原海亮
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8楼2016-01-25 14:54:25
memorize1991
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- 专业: 生物化学
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退火选55度到60度之间试一下，可以用PCR仪以1度为梯度选择合适的变性温度。你温度太低了，还有，你扩的基因有多大？复性的时间等你检查一下，……我扩过的目的基因一般在250bp左右，从变性到延伸的循环一般2小时就够了。调整好P的温度后，如果还有问题就分析一下操作和材料的问题吧。 发自小木虫Android客户端 |
9楼2016-01-25 15:41:34
10楼2016-01-25 21:19:17
