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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR扩增后，空白组有条带，是怎么回事？
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wenhuoyeying

新虫 (正式写手)

[求助] PCR扩增后，空白组有条带，是怎么回事？ 已有1人参与

用的8F,1492R引物，扩增鱼类肠道内含物的DNA，PCR扩增后，空白组有条带，鲭鱼组没有条带，，是怎么回事？求高手分析

PCR扩增后，空白组有条带，是怎么回事？
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1楼 2016-01-20 13:55:18
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joeming123

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by wenhuoyeying at 2016-01-22 13:13:52
你做出来后，结果跟我说下吧，我们交流下~~...

我换了实验室做，NTC还是有亮带。  后来我把整个PCR的试剂都换了，NTC就没有亮带了。
      PCR 的NTC有亮带，主要有两个原因，
1、实验室污染比较严重。  我的解决方案是：用10%的次氯酸钠擦拭桌面，板子和枪都擦一下，然后用紫外灯照半个小时。  第二天早上先用蒸馏水擦拭，最后在用酒精擦拭一遍。
2. 试剂污染。  除了样品以外，把整个实验室用到的试剂都换了。
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现在的路越来越难走
9楼2016-01-22 16:22:31
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匿名

用户注销 (正式写手)
★ ★
西门吹雪170: 金币+2 2016-01-20 23:09:19
本帖仅楼主可见
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2楼2016-01-20 14:02:18
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lifechuteng

新虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-20 23:09:39
我感觉PCR也没有那么灵敏，如果空白组污染了扩增出了条带，那为什么鲭鱼组没有污染呢？
会不会是您不小心放反了，我感觉还是比较有可能的。
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3楼2016-01-20 16:52:12
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wenhuoyeying

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lifechuteng at 2016-01-20 16:52:12
我感觉PCR也没有那么灵敏，如果空白组污染了扩增出了条带，那为什么鲭鱼组没有污染呢？
会不会是您不小心放反了，我感觉还是比较有可能的。

你说这个情况我考虑过，但是实验时候我确认没放反，电泳时候做了两边一直都是这个结果。鲭鱼组没有污染，这个我也很困惑，想不通~~
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4楼2016-01-20 20:05:39
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