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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR扩增后，空白组有条带，是怎么回事？
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wenhuoyeying

新虫 (正式写手)

[求助] PCR扩增后，空白组有条带，是怎么回事？ 已有1人参与

用的8F,1492R引物，扩增鱼类肠道内含物的DNA，PCR扩增后，空白组有条带，鲭鱼组没有条带，，是怎么回事？求高手分析

PCR扩增后，空白组有条带，是怎么回事？
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1楼 2016-01-20 13:55:18
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lifechuteng

新虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-20 23:09:39
我感觉PCR也没有那么灵敏，如果空白组污染了扩增出了条带，那为什么鲭鱼组没有污染呢？
会不会是您不小心放反了，我感觉还是比较有可能的。
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3楼2016-01-20 16:52:12
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匿名

用户注销 (正式写手)
★ ★
西门吹雪170: 金币+2 2016-01-20 23:09:19
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2楼2016-01-20 14:02:18
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wenhuoyeying

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lifechuteng at 2016-01-20 16:52:12
我感觉PCR也没有那么灵敏，如果空白组污染了扩增出了条带，那为什么鲭鱼组没有污染呢？
会不会是您不小心放反了，我感觉还是比较有可能的。

你说这个情况我考虑过，但是实验时候我确认没放反，电泳时候做了两边一直都是这个结果。鲭鱼组没有污染，这个我也很困惑，想不通~~
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4楼2016-01-20 20:05:39
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wenhuoyeying

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by becklittle at 2016-01-20 14:02:18
空白有条带有两种可能，一是引物设计不合理导致自身模版扩增，不过这种情况很少而且根据设计的大小跑胶能鉴定是不是。第二最常见情况就是污染了，分子生物学的污染要比细胞学污染更难处理，东西全扔了换新的，枪台面 ...

请问你说的“根据设计的大小跑胶能鉴定是不是”这个具体要怎么设计？另外，如果是空气污染的话，应该怎么办？当然枪头，台面什么的下次会注意的。
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5楼2016-01-20 20:07:43
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