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求教求教:Taq酶作用？？？有没有人告诉我
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Taq酶有没有逆转录酶的作用，比如我拿mRNA加入Taq酶，最终能合成cDNA吗。 发自小木虫Android客户端 |
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没有用的。。。去买个反转录试剂盒，反转录cDNA不仅仅需要逆转录酶，还需要在反转录之前消化一下你提取的RNA里面的DNA，这样弄出来的cDNA质量才高。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-01-16 23:11:30
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提取RNA做不到百分百纯，绝对会混有DNA的，在进行反转录的时候必须用DNA酶消化，去除所有RNA，不知道你查的是什么文献，总之taq酶没有逆转录功能。有些反转录试剂盒里面有DNA消化酶，比如说我用的takara公司反转录试剂盒，你要是没有的话单独去买一个消化DNA的试剂盒吧。 发自小木虫Android客户端 |
12楼2016-01-17 09:15:21
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我是做植物的，提取了RNA后直接取1ugRNA先用DNase消化5分钟然后做反转录，没有做PCR验证，因为只要做了DNA消化，百分百是可以除尽DNA的，如果你不放心，那就在消化之后再做一遍PCR验证就好了，记得PCR验证之前把消化体系加热灭除DNase活性，然后再取0.5ul去做模板，如果结果为阴性，结合你没做消化结果为阳性，那样就很好像别人说明你这个的的确确去除了DNA污染。住楼主实验顺利。 发自小木虫Android客户端 |
16楼2016-01-17 23:36:20
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19楼2016-01-18 11:09:16