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紫萸香慢001

新虫 (小有名气)

[交流] 求教求教:Taq酶作用???有没有人告诉我

Taq酶有没有逆转录酶的作用,比如我拿mRNA加入Taq酶,最终能合成cDNA吗。

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紫萸香慢001

新虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 原来,是这样 at 2016-01-17 09:15:21
提取RNA做不到百分百纯,绝对会混有DNA的,在进行反转录的时候必须用DNA酶消化,去除所有RNA,不知道你查的是什么文献,总之taq酶没有逆转录功能。有些反转录试剂盒里面有DNA消化酶,比如说我用的takara公司反转录 ...

嗯嗯,我也是买了专门的试剂盒,我之所以问Taq酶有没有逆转录酶作用原因是这样的,为验证无DNA污染,我将提好的mRNA用taq酶扩增相应目的片段,普通PCR跑胶结果是阳性的,每次都这样,我找不到原因,就猜想会不会taq酶也会对RNA起作用。另外,请问你做的是原核生物还是真核生物,提取的时候加了多少量,怎么验证没有DNA污染的。谢谢你啦

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14楼2016-01-17 10:27:34
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南有乔木张恺

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
当然不可以。反转录酶是另一种

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2楼2016-01-16 23:07:31
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原来,是这样

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
没有用的。。。去买个反转录试剂盒,反转录cDNA不仅仅需要逆转录酶,还需要在反转录之前消化一下你提取的RNA里面的DNA,这样弄出来的cDNA质量才高。

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3楼2016-01-16 23:11:30
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xiangyingliu

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
去买个反转录试剂盒弄,

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4楼2016-01-16 23:13:50
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