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紫萸香慢001

新虫 (小有名气)

[交流] 求教求教:Taq酶作用???有没有人告诉我

Taq酶有没有逆转录酶的作用,比如我拿mRNA加入Taq酶,最终能合成cDNA吗。

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原来,是这样

金虫 (小有名气)


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引用回帖:
6楼: Originally posted by 紫萸香慢001 at 2016-01-16 23:42:29
我就是用的提RNA的试剂盒,为验证没有DNA污染,我就拿提取的mRNA,用普通DNA的试剂盒扩增相应目的片段,结果还有阳性结果,这说明有DNA污染,但是我已经很注意了,不知道怎么去除DNA污染,然后我看有的文献说Taq酶 ...

提取RNA做不到百分百纯,绝对会混有DNA的,在进行反转录的时候必须用DNA酶消化,去除所有RNA,不知道你查的是什么文献,总之taq酶没有逆转录功能。有些反转录试剂盒里面有DNA消化酶,比如说我用的takara公司反转录试剂盒,你要是没有的话单独去买一个消化DNA的试剂盒吧。

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12楼2016-01-17 09:15:21
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南有乔木张恺

木虫 (正式写手)


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当然不可以。反转录酶是另一种

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2楼2016-01-16 23:07:31
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原来,是这样

金虫 (小有名气)


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没有用的。。。去买个反转录试剂盒,反转录cDNA不仅仅需要逆转录酶,还需要在反转录之前消化一下你提取的RNA里面的DNA,这样弄出来的cDNA质量才高。

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3楼2016-01-16 23:11:30
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xiangyingliu

银虫 (小有名气)


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去买个反转录试剂盒弄,

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4楼2016-01-16 23:13:50
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