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紫萸香慢001

新虫 (小有名气)

[交流] 求教求教:Taq酶作用???有没有人告诉我

Taq酶有没有逆转录酶的作用,比如我拿mRNA加入Taq酶,最终能合成cDNA吗。

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原来,是这样

金虫 (小有名气)


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引用回帖:
14楼: Originally posted by 紫萸香慢001 at 2016-01-17 10:27:34
嗯嗯,我也是买了专门的试剂盒,我之所以问Taq酶有没有逆转录酶作用原因是这样的,为验证无DNA污染,我将提好的mRNA用taq酶扩增相应目的片段,普通PCR跑胶结果是阳性的,每次都这样,我找不到原因,就猜想会不会ta ...

我是做植物的,提取了RNA后直接取1ugRNA先用DNase消化5分钟然后做反转录,没有做PCR验证,因为只要做了DNA消化,百分百是可以除尽DNA的,如果你不放心,那就在消化之后再做一遍PCR验证就好了,记得PCR验证之前把消化体系加热灭除DNase活性,然后再取0.5ul去做模板,如果结果为阴性,结合你没做消化结果为阳性,那样就很好像别人说明你这个的的确确去除了DNA污染。住楼主实验顺利。

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16楼2016-01-17 23:36:20
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南有乔木张恺

木虫 (正式写手)


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当然不可以。反转录酶是另一种

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2楼2016-01-16 23:07:31
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原来,是这样

金虫 (小有名气)


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没有用的。。。去买个反转录试剂盒,反转录cDNA不仅仅需要逆转录酶,还需要在反转录之前消化一下你提取的RNA里面的DNA,这样弄出来的cDNA质量才高。

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3楼2016-01-16 23:11:30
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xiangyingliu

银虫 (小有名气)


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去买个反转录试剂盒弄,

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4楼2016-01-16 23:13:50
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