24小时热门版块排行榜    

查看: 2986  |  回复: 18
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

chenkaihao

银虫 (小有名气)

[求助] 用大肠杆菌表达重组蛋白,总在摇瓶扩大时出现先浑后澄清和诱导后变澄清的现象,为什么 已有7人参与

在用大肠杆菌表达重组蛋白(有毒的和普通的)时,总出现扩大时变澄清,即首先测OD=0.3,后来测又是0.1的现象;或诱导一段时间后变清,收到的菌体很少,平常离心参数下,菌体离不下来的情况。噬菌体感染的状况基本很少,无菌操作没问题。但是同一瓶活化液再次扩大,它又扩大成功了;有时同一瓶活化液扩大几瓶,会出现一瓶摇澄清,另几瓶正常的现象。
现在很头疼,麻烦各位虫友解答下,拜托了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

就算是羽毛,它也能在天空畅游
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenkaihao

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 肖大爷1314 at 2016-01-06 10:22:01
这事不奇怪。经常出现。两个方面分析我建议
首先,你若是挑的单克隆。换个单克隆试试。这极有可能是这个单克隆的特性。
然后,如果换了还不行。换个骨架试试。这很有可能是细胞毒性的问题。换一个对leak控制更严格 ...

应该不是本底表达引起,毕竟有摇混过的现象,且纯化到了蛋白。
就算是羽毛,它也能在天空畅游
6楼2016-01-12 17:30:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

肖大爷1314

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这事不奇怪。经常出现。两个方面分析我建议
首先,你若是挑的单克隆。换个单克隆试试。这极有可能是这个单克隆的特性。
然后,如果换了还不行。换个骨架试试。这很有可能是细胞毒性的问题。换一个对leak控制更严格的载体。或者表达系统。如果排除细胞毒性的话,你可以看看是不是基因在载体上连反了,连反了好像也会这样,iptg的量也要注意~
最后,LZ祝顺利~
追求真理的道路上永远不会孤独
2楼2016-01-06 10:22:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小花木兰

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个问题的确头疼,我们也经常遇到,有时大罐上也有。目前没有找到原因
3楼2016-01-06 15:21:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感受态(出发菌株)退化引起的
4楼2016-01-06 16:30:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +3 kongweilin 2026-03-26 5/250 2026-03-26 09:01 by 丶风雪夜归人丶
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 335分 | 材料与化工专硕 | GPA 4.07 | 有科研经历 +6 cccchenso 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:25 by 544594351
[考研] 求调剂 +3 QiMing7 2026-03-25 3/150 2026-03-25 21:13 by 给你你注意休息
[考研] 0854电子信息求调剂 +7 α____ 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 281求调剂 +4 Koxui 2026-03-24 5/250 2026-03-25 11:38 by userper
[考研] 考研化学308分求调剂 +10 你好明天你好 2026-03-23 11/550 2026-03-25 10:23 by userper
[考研] 食品专硕 一志愿双一流 328 +3 xiaom99 2026-03-21 4/200 2026-03-24 21:20 by lailaisimei
[考研] 材料调剂 +6 匹克i 2026-03-23 6/300 2026-03-24 21:09 by greychen00
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考研] 350求调剂 +6 weudhdk 2026-03-19 6/300 2026-03-23 15:47 by tangyuan0840221
[考研] 一志愿070300浙大化学358分,求调剂! +4 酥酥鱼.. 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 22 350 本科985求调剂,求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 0856调剂,是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
信息提示
请填处理意见