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家喻户晓新虫 (小有名气)
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我之前用一对引物58℃扩启动子，也扩出来了，现在连T载，挑阳性克隆，为什么一直没有，是不是加有酶切位点的引物的退火温度应该提高一点啊！ 发自小木虫Android客户端 |
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科学小覃
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2楼2015-12-30 20:11:08
3楼2015-12-30 20:34:46
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4楼2015-12-30 20:54:29
家喻户晓
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5楼2015-12-30 21:30:23
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6楼2015-12-30 21:32:37
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7楼2015-12-30 21:35:35
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8楼2015-12-30 22:02:01
9楼2015-12-30 22:03:31
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Was it your first time of screening for recombinants? You did get the resulting recombinants afer TA-cloning, though the colony PCR was false negative. Therefore, something wrong might happen while you made colony preparation for colony PCR. A well isolated colony was picked and transferred to 50ul of sterile water, boiled for 10 minutes, centrifuged at 12000rpm for 5minutes, and 2ul of the supernatant was used in each amplification (20ul volumes in total). |
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2015-12-30 22:55:47, 415.77 K
10楼2015-12-30 22:56:04
