| 查看: 1058 | 回复: 6 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
椪柑某基因全长扩增遇到困难，请大家指点指点，谢谢！
|
|||
|
现在在做椪柑HSF基因的克隆实验，已有柑橘（椪柑属于柑橘属）全基因组序列，需要扩增的基因序列是在甜橙基因库里搜索得到的（http://citrus.hzau.edu.cn/orange/index.php）。甜橙基因库中找到目标基因CDS区域，用primerp5头尾数出长度为17-24bp的碱基作为引物（下游为互补），但都无法扩增出条带（17-27bp的都试过了），已经做将近一个月了，很想在过年前做完，很是苦恼。 酶用的是TAKARA的LA-taq酶； cDNA使用前用actenin检测，感觉也没啥大问题； 同属不同品种的植物基因序列会不会出现差异导致无法扩增？； 引物设计基本原则也知道，但是需要克隆CDS区域全序列，只能在头尾设计的引物，所以在primer5上的评分并不高，但若椪柑中存在该基因PCR扩增引物应该也不会有多大问题呀！？； 大家以前有做过类似实验吗，请说出你们的想法和建议，谢谢！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
江苏省优青门槛
已经有20人回复
-
心好累。今年我们部门提交了18个项目。中了11了，可惜我的又挂了
已经有10人回复
-
植物学论文润色/翻译怎么收费?
已经有74人回复
-
面上项目计划书
已经有7人回复
-
面上项目计划书附件
已经有9人回复
-
面上项目计划书系统状态
已经有18人回复
-
NSFC-UNEP（与联合国环境规划署）合作项目
已经有33人回复
-
和伊朗人合作
已经有32人回复
-
江苏省自然基金
已经有7人回复
-
生命科学新英文普刊《INVESTIGATION OF LIFE SCIENCE》
已经有9人回复
6楼2016-03-14 09:31:13
2楼2015-12-25 18:00:37
3楼2015-12-25 20:47:51
4楼2015-12-25 20:54:38
