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RNA世界铁虫 (初入文坛)
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DNA粗提取的问题
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我在做番茄的稳定转基因。 然后现在是需要提取DNA做PCR鉴定 我的提取方法大概是这样的。 在1.5ml离心管里加100微升的无菌水，然后加入植物叶片样品，研磨匀浆 加入150微升的细胞裂解液，成分我忘了，含有EDTA和Tris等 然后加入150微升异丙醇。-20度沉淀DNA，大概一个小时 14000rpm 2分钟 离心，取上清 用75%乙醇洗两次，每次都是14000rpm 2分钟 最后，晾干后，用dd水溶解。 然后现在的情况是PCR后没有条带。我怀疑是DNA提取的问题。 这个过程只是粗提，并没有纯化，因为PCR好像也不要求样品有多高的纯度 想请大家帮我看看，问题可能会出在哪里呢？ |
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yvonne9044
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2楼2015-12-19 23:24:57
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lzq_112233
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用你说的方法，仅仅是粗提，DNA量很小，用于PCR应该没有问题，如果没有P出来，考虑一下引物的问题，或者在你的方法上少做更改，在裂解后，吸上清，24:1氯仿异戊醇抽提一次，沉淀半小时后面的就一样了 发自小木虫Android客户端 |
4楼2015-12-26 13:22:33
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