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RNA世界铁虫 (初入文坛)
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DNA粗提取的问题
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我在做番茄的稳定转基因。 然后现在是需要提取DNA做PCR鉴定 我的提取方法大概是这样的。 在1.5ml离心管里加100微升的无菌水,然后加入植物叶片样品,研磨匀浆 加入150微升的细胞裂解液,成分我忘了,含有EDTA和Tris等 然后加入150微升异丙醇。-20度沉淀DNA,大概一个小时 14000rpm 2分钟 离心,取上清 用75%乙醇洗两次,每次都是14000rpm 2分钟 最后,晾干后,用dd水溶解。 然后现在的情况是PCR后没有条带。我怀疑是DNA提取的问题。 这个过程只是粗提,并没有纯化,因为PCR好像也不要求样品有多高的纯度 想请大家帮我看看,问题可能会出在哪里呢? |
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3楼2015-12-20 00:48:11
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