24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1050  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

changmaster

新虫 (小有名气)

[求助] qpcr模板问题 已有2人参与

最近在做荧光定量,很是苦恼模板cDNA的问题,每次反应都要加2微升,但是每次反转也就得到20微升而已,要验证基因多的话,模板根本不够,但反转录试剂盒又很贵。。。。
请问,大家对反转录完的20微升cDNA都稀释了吗,稀释后,跑荧光定量效果会不会不好呢?
回复此楼
做自己,不试图成为任何人
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

射手鱼卷

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以用10微升的体系,我们实验室用的是Thermo的试剂
Mix  5微升
水   3.5微升
F      0.5微升
R    0.5微升
cDNA  0.5微升
4楼2016-01-10 22:58:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

奇怪人生123

银虫 (小有名气)

之前每次做反转录,会同时做好多管,大约20管左右,就是20*20微升。你一次就反转录一管,20微升吗?每一次荧光定量之前都反转录一次,这岂不是麻烦的要死啊.......
实时荧光定量PCR(TaqMan探针法)欢迎和大家探讨~
2楼2015-12-17 16:34:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

兽医做科研

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们实验室做荧光定量之前都是要摸一个稀释浓度的,然后稀释后做,这样可以节省样品,对结果应该不会有什么影响,只要Ct值在可信范围内就可以了

发自小木虫Android客户端
3楼2015-12-17 16:39:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0710生物学336分求调剂 +6 kiyy 2026-04-01 6/300 2026-04-04 07:16 by yzcyy
[考研] 357求调剂 +13 1050389037 2026-04-03 13/650 2026-04-03 22:27 by 无际的草原
[考研] 353求调剂 +5 MayUxw1 2026-04-03 5/250 2026-04-03 21:17 by 啵啵啵0119
[考研] 303求调剂 +10 DLkz1314. 2026-03-30 10/500 2026-04-03 18:03 by Jimmyandyou
[考研] 372分材料与化工(085600)一志愿湖南大学求调剂 +3 蓝笺片 2026-04-03 4/200 2026-04-03 17:58 by Jimmyandyou
[考研] 材料专硕调剂 +18 椰椰。 2026-03-29 18/900 2026-04-03 16:45 by 玲玲0606
[考研] 一志愿中国科学院大学265求调剂 +9 恬淡ye 2026-03-31 10/500 2026-04-03 11:10 by txp1986
[考研] 085600,320分求调剂 +6 大馋小子 2026-04-02 6/300 2026-04-02 21:54 by dongzh2009
[考研] 材料化工340求调剂 +5 jhx777 2026-03-30 5/250 2026-04-02 12:45 by smileboy2006
[考研] 266分,一志愿电气工程,本科材料,求材料专业调剂 +10 哇呼哼呼哼 2026-04-01 11/550 2026-04-02 11:31 by lnilvy
[考研] 271求调剂 +15 勒布朗@ 2026-03-31 20/1000 2026-04-02 11:24 by Sammy2
[考研] 385分 生物学(071000)求调剂 +6 qf626 2026-04-01 6/300 2026-04-02 10:39 by guoweigw
[考研] 0710生物学求调剂 +9 manman511 2026-04-01 9/450 2026-04-02 10:00 by zxl830724
[考研] 材料调剂 +14 一样YWY 2026-04-01 14/700 2026-04-01 21:07 by lijunpoly
[考研] 350求调剂 +7 阿佳~ 2026-03-31 7/350 2026-04-01 16:12 by yanflower7133
[考研] 309求调剂 +19 谁不是少年 2026-03-29 19/950 2026-04-01 15:47 by jp9609
[考研] 材料调剂 +10 Eujd1 2026-03-31 11/550 2026-04-01 11:23 by ivanqyq
[考研] 考研生物与医药调剂 +7 铁憨憨123425 2026-03-31 7/350 2026-04-01 08:45 by JourneyLucky
[考研] 一志愿食品科学与工程083200求调剂 +4 XQTJZ 2026-03-30 4/200 2026-03-31 04:10 by fmesaito
[考研] 11408软件工程求调剂 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 21:50 by zhq0425
信息提示
请填处理意见