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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 筛菌筛不出来啊
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11石宝

新虫 (小有名气)

[求助] 筛菌筛不出来啊 已有4人参与

我在筛一株以甲基叔丁基醚为唯一碳源降解的菌株，在摇瓶中转接都能够降解的，但是涂布分离得到的菌株都不能降解该底物。同时我的摇瓶在培养过程中都会出现颗粒物质，每次转接即使没有接颗粒物质最后都能长出颗粒物质的（短暂的超声破碎后培养结果也一样）。反复添加几次底物，摇瓶中的菌液会变浑浊一些，但是其中存在大量颗粒物质。求大神求大神。这个活本来是同门的，她筛了一年半没筛出来，老师让我做了喂，我现在遇到和同门一样的瓶颈了。

筛菌筛不出来啊
中间和右图分别是加底物的摇瓶都长颗粒了
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1楼 2015-12-16 20:28:19
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yunzhini

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
11石宝: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢 2015-12-23 18:00:38
引用回帖:
8楼: Originally posted by 11石宝 at 2015-12-22 20:56:38
额，需要怎么测？
...

把下面的颗粒想办法滤出来，划个线或涂个布，看长不长，长几种？
菌降解甲基叔丁基醚后是什么，就找那个东西的纯品和你滤出来的东西一起跑个板或是HPLC看是不是一种东西
至于是不是菌体的次级代谢产物，这个，我没搞过，只是对你的那个实验结果提个可能性
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11石宝
9楼2015-12-23 08:26:47
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普通回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先要确定你接这个摇瓶的菌是纯种，还是混合种。在摇瓶中转接可以，那你就用摇瓶转接好了，平板不长，不知道啥原因。颗粒正常啊，真菌液态摇瓶培养都会出现颗粒的，细菌不会。祝顺利
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2楼2015-12-17 09:26:26
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11石宝

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2015-12-17 09:26:26
首先要确定你接这个摇瓶的菌是纯种，还是混合种。在摇瓶中转接可以，那你就用摇瓶转接好了，平板不长，不知道啥原因。颗粒正常啊，真菌液态摇瓶培养都会出现颗粒的，细菌不会。祝顺利

筛菌中，图中的瓶子中不是纯菌，摇瓶转接几次后涂布得到的菌，再转接摇瓶降解不了底物啊。现在又重新来过，先摇瓶培养了。应该不是真菌，除了颗粒状，没有其他真菌的特性

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3楼2015-12-18 10:23:47
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

既然不是纯种，在传代过程中，有的菌越来越弱，有的越来越强。西安用你的要降解的底物（C源）进行选择性富集培养，先让你的目标菌群成为优势种，然后划线啊，或者在用选择性培养基继续纯化。混合菌培养着，各菌的比例就变。把你摇瓶的混合菌用甲基叔丁基醚为唯一碳源，进行选择性赛选，颗粒先不管，先塞到你要的菌， 在说后续的，祝顺利。
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11石宝
4楼2015-12-18 10:30:39
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11石宝

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hc-material at 2015-12-18 10:30:39
既然不是纯种，在传代过程中，有的菌越来越弱，有的越来越强。西安用你的要降解的底物（C源）进行选择性富集培养，先让你的目标菌群成为优势种，然后划线啊，或者在用选择性培养基继续纯化。混合菌培养着，各菌的比 ...

恩，我是这么做的。摇瓶转接了四次都能降底物，但是拿去涂布长出来的菌再转接就不能降底物了

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5楼2015-12-21 21:01:38
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11石宝

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by hc-material at 2015-12-18 10:30:39
既然不是纯种，在传代过程中，有的菌越来越弱，有的越来越强。西安用你的要降解的底物（C源）进行选择性富集培养，先让你的目标菌群成为优势种，然后划线啊，或者在用选择性培养基继续纯化。混合菌培养着，各菌的比 ...

是用转接的第四批摇瓶涂布的，涂布得到的菌也分别纯化了，将它们分别接到摇瓶中，但是都不降解我的底物

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6楼2015-12-21 21:05:12
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yunzhini

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

下面的颗粒你测了吗？是菌体还是代谢物亦或是降解后的产物？
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7楼2015-12-22 08:09:57
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11石宝

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by yunzhini at 2015-12-22 08:09:57
下面的颗粒你测了吗？是菌体还是代谢物亦或是降解后的产物？

额，需要怎么测？

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8楼2015-12-22 20:56:38
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chenlin12345

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

颗粒有可能是菌种生长过程中的吧，我之前培养的菌种刚开始也是出现颗粒，不管他让他继续培养生长。感觉你的菌可能是不是纯菌，可以把你筛选的菌测个序，看看是不是纯的，做个功能基因看看有没有此基因，不知道能不能帮到你，
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认真做自己
10楼2015-12-23 11:08:50
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