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11石宝

新虫 (小有名气)

[求助] 筛菌筛不出来啊 已有4人参与

我在筛一株以甲基叔丁基醚为唯一碳源降解的菌株,在摇瓶中转接都能够降解的,但是涂布分离得到的菌株都不能降解该底物。同时我的摇瓶在培养过程中都会出现颗粒物质,每次转接即使没有接颗粒物质最后都能长出颗粒物质的(短暂的超声破碎后培养结果也一样)。反复添加几次底物,摇瓶中的菌液会变浑浊一些,但是其中存在大量颗粒物质。求大神求大神。这个活本来是同门的,她筛了一年半没筛出来,老师让我做了喂,我现在遇到和同门一样的瓶颈了。

筛菌筛不出来啊
中间和右图分别是加底物的摇瓶都长颗粒了
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yunzhini

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
11石宝: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢 2015-12-23 18:00:38
引用回帖:
8楼: Originally posted by 11石宝 at 2015-12-22 20:56:38
额,需要怎么测?
...

把下面的颗粒想办法滤出来,划个线或涂个布,看长不长,长几种?
菌降解甲基叔丁基醚后是什么,就找那个东西的纯品和你滤出来的东西一起跑个板或是HPLC看是不是一种东西
至于是不是菌体的次级代谢产物,这个,我没搞过,只是对你的那个实验结果提个可能性

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9楼2015-12-23 08:26:47
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普通回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先要确定你接这个摇瓶的菌是纯种,还是混合种。在摇瓶中转接可以,那你就用摇瓶转接好了,平板不长,不知道啥原因。颗粒正常啊,真菌液态摇瓶培养都会出现颗粒的,细菌不会。祝顺利
2楼2015-12-17 09:26:26
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11石宝

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2015-12-17 09:26:26
首先要确定你接这个摇瓶的菌是纯种,还是混合种。在摇瓶中转接可以,那你就用摇瓶转接好了,平板不长,不知道啥原因。颗粒正常啊,真菌液态摇瓶培养都会出现颗粒的,细菌不会。祝顺利

筛菌中,图中的瓶子中不是纯菌,摇瓶转接几次后涂布得到的菌,再转接摇瓶降解不了底物啊。现在又重新来过,先摇瓶培养了。应该不是真菌,除了颗粒状,没有其他真菌的特性

发自小木虫IOS客户端
3楼2015-12-18 10:23:47
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

既然不是纯种,在传代过程中,有的菌越来越弱,有的越来越强。西安用你的要降解的底物(C源)进行选择性富集培养,先让你的目标菌群成为优势种,然后划线啊,或者在用选择性培养基继续纯化。混合菌培养着,各菌的比例就变。把你摇瓶的混合菌用甲基叔丁基醚为唯一碳源,进行选择性赛选,颗粒先不管,先塞到你要的菌, 在说后续的,祝顺利。

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4楼2015-12-18 10:30:39
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11石宝

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hc-material at 2015-12-18 10:30:39
既然不是纯种,在传代过程中,有的菌越来越弱,有的越来越强。西安用你的要降解的底物(C源)进行选择性富集培养,先让你的目标菌群成为优势种,然后划线啊,或者在用选择性培养基继续纯化。混合菌培养着,各菌的比 ...

恩,我是这么做的。摇瓶转接了四次都能降底物,但是拿去涂布长出来的菌再转接就不能降底物了

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5楼2015-12-21 21:01:38
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11石宝

新虫 (小有名气)

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引用回帖:
4楼: Originally posted by hc-material at 2015-12-18 10:30:39
既然不是纯种,在传代过程中,有的菌越来越弱,有的越来越强。西安用你的要降解的底物(C源)进行选择性富集培养,先让你的目标菌群成为优势种,然后划线啊,或者在用选择性培养基继续纯化。混合菌培养着,各菌的比 ...

是用转接的第四批摇瓶涂布的,涂布得到的菌也分别纯化了,将它们分别接到摇瓶中,但是都不降解我的底物

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6楼2015-12-21 21:05:12
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yunzhini

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

下面的颗粒你测了吗?是菌体还是代谢物亦或是降解后的产物?
7楼2015-12-22 08:09:57
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11石宝

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by yunzhini at 2015-12-22 08:09:57
下面的颗粒你测了吗?是菌体还是代谢物亦或是降解后的产物?

额,需要怎么测?

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8楼2015-12-22 20:56:38
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chenlin12345

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

颗粒有可能是菌种生长过程中的吧,我之前培养的菌种刚开始也是出现颗粒,不管他让他继续培养生长。感觉你的菌可能是不是纯菌,可以把你筛选的菌测个序,看看是不是纯的,做个功能基因看看有没有此基因,不知道能不能帮到你,
认真做自己
10楼2015-12-23 11:08:50
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