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求助TA克隆板子长好多克隆,均是假阳性怎么回事及易错PCR有时候扩不出片段
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seraphlx
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求助
]
求助TA克隆板子长好多克隆,均是假阳性怎么回事及易错PCR有时候扩不出片段
已有1人参与
我用taq酶做易错PCR,片段3150kb,用pEASY-T1 载体,连接按照要求,每次转化板子都长的不少,也不是那种成片的,但是均假阳性,已经做好久了,而且扩片段用过不同引物,不存在引物的问题。板子基本每次连接都是新倒的Amp板。为什么片段没连进去还是长好多克隆?PCR产物是回收的。还有做易错PCR,好多时候扩不出片段来又是怎么回事?
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1楼
2015-12-16 19:31:53
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lutu2013
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专业: 作物分子育种
【答案】应助回帖
★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。
2015-12-18 12:36:26
建议用pEASY-T5 贵不了多少 但是阳性率很高
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seraphlx
2楼
2015-12-16 22:12:34
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seraphlx
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专业: 生物化学
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引用回帖:
2楼
:
Originally posted by
lutu2013
at 2015-12-16 22:12:34
建议用pEASY-T5 贵不了多少 但是阳性率很高
谢谢,刚换用T5
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3楼
2015-12-18 09:35:47
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yuman0709
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专业: 微生物遗传育种学
楼主,你的问题最终解决了吗?我和你遇到了一样的问题,也拖了好长时间,好急人啊!不知道楼主怎么解决的?
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4楼
2015-12-23 15:33:30
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ygaihonghong
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注册: 2014-12-15
性别: GG
专业: 作物分子育种
楼主你好,你的问题解决没我也遇到同样的问题啦,怎么回事啊
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5楼
2016-01-05 18:19:15
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Guoliangxia1
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模版是胶回收产物吗?
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6楼
2016-07-09 11:13:39
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