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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助TA克隆板子长好多克隆，均是假阳性怎么回事及易错PCR有时候扩不出片段
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seraphlx

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助TA克隆板子长好多克隆，均是假阳性怎么回事及易错PCR有时候扩不出片段 已有1人参与

我用taq酶做易错PCR，片段3150kb,用pEASY-T1 载体，连接按照要求，每次转化板子都长的不少，也不是那种成片的,但是均假阳性，已经做好久了，而且扩片段用过不同引物，不存在引物的问题。板子基本每次连接都是新倒的Amp板。为什么片段没连进去还是长好多克隆？PCR产物是回收的。还有做易错PCR，好多时候扩不出片段来又是怎么回事？
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1楼 2015-12-16 19:31:53
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Guoliangxia1

新虫 (初入文坛)
模版是胶回收产物吗？

发自小木虫IOS客户端
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6楼2016-07-09 11:13:39
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lutu2013

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-12-18 12:36:26
建议用pEASY-T5  贵不了多少   但是阳性率很高
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

seraphlx
2楼2015-12-16 22:12:34
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seraphlx

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by lutu2013 at 2015-12-16 22:12:34
建议用pEASY-T5  贵不了多少   但是阳性率很高

谢谢，刚换用T5
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3楼2015-12-18 09:35:47
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yuman0709

铁虫 (初入文坛)
楼主，你的问题最终解决了吗？我和你遇到了一样的问题，也拖了好长时间，好急人啊！不知道楼主怎么解决的？
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4楼2015-12-23 15:33:30
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