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PCR产物除目的条带外还有一条很亮的条带,请问如何优化条件?
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PCR产物除目的条带外还有一条很亮的条带,请问如何优化条件?
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PCR一个月啦,目的条带可以得到,就是电泳图中还有一条较明亮的条带,退火温度也升高了,么得用啊,请求大家帮忙,献计献策!
IMG_20151216_131225.jpg
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2015-12-16 16:08:24
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棍子168
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你的目的条带切下来可以用,测序一下。估计引物需要重新设计了吧
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天道酬勤
2楼
2015-12-16 16:37:03
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你阴性是那个呀,引物从新设计吧。
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采菊东篱下,悠然见南山。
3楼
2015-12-16 17:14:13
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liyu6655
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2015-12-18 09:23:18
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rwang1108
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我试过一次减少dNTPs,那次成了,你也可以调整一下反应体系
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5楼
2015-12-18 09:49:45
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anya50
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产物非特异性条带多可以试试适当调高退火温度
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6楼
2015-12-18 10:57:08
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切胶回收,测序
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宁静致远
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2015-12-18 13:10:54
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2楼
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Originally posted by
棍子168
at 2015-12-16 16:37:03
你的目的条带切下来可以用,测序一下。估计引物需要重新设计了吧
谢谢啦,老师说切胶会损失的,后面是要测T-RFLP~
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8楼
2015-12-18 21:08:50
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songjie851
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专业: 色谱分析
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你的目的条带是哪一条?如果上边的是非特异条带,可以试试缩短延伸时间。另外,你可以找一下官网上酶的说明书,比如takara的酶,说明书上就写了怎么优化pcr
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9楼
2015-12-19 09:01:36
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vivd娟
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弥散的厉害啊
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10楼
2015-12-19 10:34:15
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