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电泳多条带
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1.pcr产物电泳后有多条带，除了目的带之外的带可能性原因有哪些呢？ 2.用M13筛克隆电泳后除目的带外还有像引物二聚体似的带，是什么带呢？ 求解~ |
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gwbk
木虫 (正式写手)
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【答案】应助回帖
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晓惜凝香(金币+2): 多谢 2011-08-22 11:43:55
lstt09nk(金币+5): 感谢参与 2011-08-22 12:38:20
晓惜凝香(金币+2): 多谢 2011-08-22 11:43:55
lstt09nk(金币+5): 感谢参与 2011-08-22 12:38:20
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排除了电泳没有污染其他DNA之后，可以从PCR过程找原因。 1，退火温度：退火温度越高，特异性越好。 2，Mg2+浓度：一般都是预加的。理论上Mg2+浓度高会引起扩增特异性降低。 3，引物的特异性：这个不用说了。 4，模板量：模板适量，不要太多。 5，DNA污染：这种情况遇到较少。 6，酶的质量：好多国产酶不给力。 M13一般不会出现二聚体的，我的PCR一般会在200bp出现很亮条带，我认为时非特异性扩增。 |
2楼2011-08-22 11:35:40