| 查看: 861 | 回复: 0 | ||
[求助]
大神帮忙。载体连接不上，我欲哭无泪呀，好心的路过的帮帮忙
|
|
各位大神帮帮忙，我最近在连载体，双酶切PCR产物连接，发现T载体PCR做胶回收，回收后取1ul检测回收效果发现，除目的条带大概500bp处有亮带外，1000bp处还隐约有条带存在。然后我继续往后做双酶切，双酶切用SacI和BamhI，37°C，6h左右再做胶回收，胶回收后1ul检测，仍然存在两条带。现在我已经排除是跑胶或者是回收的问题了，下一步准备排除可能存在酶污染的问题。 所以我想问的就是（1）：为什么我PCR产物切胶回收，切的是目的条带，回收后检测却会出现杂带呢？ 下面有我的跑胶图片，各位大神帮忙看看吧，我连这个载体都快一个月了，都还没连上，老板也使劲催，压力山大呀。谢谢各位师兄师姐了。（因为我刚注册，也还不会怎么操作小木虫，所以没什么金币，不能悬赏，各位大神见谅，^-^) PS：图片说明：marker条带依次是5000bp,3000bp,2000bp,1000bp,750bp,500bp,250bp,100bp.第一张图是我T载体PCR回收图，第二张图是PCR产物回收后1ul检测图,第三张图是回收的pcr产物双酶切再跑胶回收后1ul的检测图。  图片.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
面上项目filecode邪修
已经有6人回复
-
应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键
已经有14人回复
-
2026国自然放榜时间
已经有4人回复
-
关于代码变化问题，想知道的进来
已经有22人回复
-
这样的filecode谁见过
已经有21人回复
-
filecode与中标关系的预测
已经有5人回复
-
fileCode有新解读？
已经有18人回复
-
关于filecode，很负责任的告诉大家
已经有7人回复
-
【2027博士申请】纳米药物递送方向
已经有5人回复
-
关于豆爷回答的JTJC与%2F数量
已经有7人回复
20