应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 已知一个基因通过转录组获得的cDNA序列，如何设计引物克隆这个基因
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 8275  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

crab1983

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] 已知一个基因通过转录组获得的cDNA序列，如何设计引物克隆这个基因 已有1人参与

我手里有想要克隆的基因的转录组获得的cDNA序列，但不知道如何设计引物。我看有的人用RACE的方法克隆全长，我不需要克隆全长。我原来以为，把拿到的转录组的这个cDNA序列直接设计引物就行，但是我看到很多文献，都是找出开放阅读框来设计引物的。所以现在不知道该怎么做了，太着急了。请给位大侠帮帮忙。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-12-14 18:24:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crab1983

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
9楼: Originally posted by jianguochen at 2015-12-16 09:15:10
转到拟南芥里做表达的话，就扩增完整的ORF，需要的话，加上酶切位点用于后面的载体连接。转拟南芥的话你们实验室要是有这方面的经验就没什么难度，没有的话可以考虑送公司，很快的。还有就是你这个基因的功能是什么 ...

我这个基因是植物光合作用过程中的酶，理论上转到拟南芥中应该能提高拟南芥的光合速率。
赞一下 回复此楼
10楼2016-02-23 10:25:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

jianguochen

兑换贵宾

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
主要还是看你扩增出来的序列用于做什么，表达的话可以分析下你的序列里共有多少个开放阅读框，哪个阅读框是你的序列。再根据ORF序列从起始密码子到终止密码子设计引物扩就是了。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2015-12-14 18:39:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

管理员

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
crab1983: 金币+3, ★★★很有帮助 2016-03-11 15:14:49
先用你的序列做blastx，看是否含有完整ORF，看编码区的具体位置，然后再根据你的需要设计引物，做定量的话，不需要有完整ORF，但是如果做表达研究功能，那需要有完整ORF，如没有，就做RACE扩全长。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2015-12-15 11:48:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crab1983

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
2楼: Originally posted by jianguochen at 2015-12-14 18:39:54
主要还是看你扩增出来的序列用于做什么，表达的话可以分析下你的序列里共有多少个开放阅读框，哪个阅读框是你的序列。再根据ORF序列从起始密码子到终止密码子设计引物扩就是了。

我就是要这个基因克隆出来，然后转到拟南芥里面，鉴定一下。该怎么做呀？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2015-12-15 17:51:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 环境工程 085701，267求调剂 +14 minht 2026-03-29 14/700 2026-04-01 01:42 by 1018329917
[考研] 324分 085600材料与化工 +9 呆鹅oor 2026-03-27 9/450 2026-04-01 00:46 by fmesaito
[考研] 求调剂推荐 材料 304 +18 荷包蛋hyj 2026-03-26 18/900 2026-03-31 18:08 by 544594351
[考研] 346求调剂 一志愿070303有机化学 +11 萝卜炖青菜 2026-03-28 12/600 2026-03-31 17:54 by xhai2011
[考研] 343求调剂 +8 爱羁绊 2026-03-28 8/400 2026-03-31 16:12 by 不吃魚的貓
[考研] 289求调剂 +3 Acesczlo 2026-03-29 4/200 2026-03-31 14:48 by 热情沙漠
[考研] 354求调剂 +3 lxb598 2026-03-31 4/200 2026-03-31 13:42 by sophie2180
[考研] 266分，求材料冶金能源化工等调剂 +8 哇呼哼呼哼 2026-03-27 10/500 2026-03-31 13:35 by Huaxue_Wang
[考研] 0703化学 +20 妮妮ninicgb 2026-03-27 20/1000 2026-03-31 13:33 by 无际的草原
[考研] 调剂310 +13 温柔的晚安 2026-03-25 14/700 2026-03-31 13:03 by 记事本2026
[考研] 一志愿食品科学与工程083200求调剂 +4 XQTJZ 2026-03-30 4/200 2026-03-31 04:10 by fmesaito
[考研] 083000环境科学与工程调剂，总分281 +4 橙子（胜意） 2026-03-30 4/200 2026-03-31 00:44 by Linzejun
[考研] 哈尔滨工业大学材料与化工专硕378求调剂 +3 塔比乌斯 2026-03-30 3/150 2026-03-30 22:55 by 无际的草原
[考研] 303求调剂 +7 DLkz1314. 2026-03-30 7/350 2026-03-30 21:07 by peike
[考研] 304材料求调剂 +5 钟llll 2026-03-26 5/250 2026-03-30 19:37 by 源_2020
[考研] 356求调剂 +3 gysy?s?a 2026-03-28 3/150 2026-03-29 00:33 by 544594351
[考研] 286求调剂 +12 PolarBear11 2026-03-26 12/600 2026-03-28 12:14 by zllcz
[考研] 339求调剂，想调回江苏 +6 烤麦芽 2026-03-27 8/400 2026-03-28 10:40 by 烤麦芽
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-26 9/450 2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +6 kongweilin 2026-03-26 8/400 2026-03-27 10:18 by FF_16
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭