| 查看: 6165 | 回复: 14 | ||
Mingle_Su银虫 (小有名气)
|
[求助]
CoIP/蛋白互作|| 阴性对照杂出条带 ||FLAG HA Triton 洗涤 原生质体瞬时表达 已有2人参与
|
|
阴性对照的也被沉淀下来了，一周的实验就这样废了，请各位资深朋友帮分析下原因。每个样品用了20ul带FLAG抗体的磁珠（sigma），孵育结合后用0.1%的Triton 100 洗涤4次，最后用50mM的Tris-HCl pH=7.5 洗涤，每次洗涤均用1mL的buffer。个人觉得应该不是珠子没洗干净，另外考虑蛋白直接结合磁珠，两个完全不相关的蛋白都可以结合磁珠更加不可能。只能想到以上两个比较直接原因，请各位高手指教。 具体问题见下图，谢谢！ CoIP |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有160人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 免疫共沉淀没有特异性条带
已经有0人回复
mofashishe
铜虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1613.1
- 散金: 334
- 红花: 4
- 帖子: 174
- 在线: 67.8小时
- 虫号: 590752
- 注册: 2008-09-01
- 专业: 植物病理学
8楼2015-12-13 23:01:29
2楼2015-12-13 11:19:35
mofashishe
铜虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1613.1
- 散金: 334
- 红花: 4
- 帖子: 174
- 在线: 67.8小时
- 虫号: 590752
- 注册: 2008-09-01
- 专业: 植物病理学
3楼2015-12-13 11:37:54
Mingle_Su
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 536.7
- 散金: 25
- 帖子: 85
- 在线: 27.9小时
- 虫号: 1311977
- 注册: 2011-05-31
- 性别: GG
- 专业: 头颈部及颌面肿瘤
4楼2015-12-13 13:32:07
Mingle_Su
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 536.7
- 散金: 25
- 帖子: 85
- 在线: 27.9小时
- 虫号: 1311977
- 注册: 2011-05-31
- 性别: GG
- 专业: 头颈部及颌面肿瘤
5楼2015-12-13 13:36:18
mofashishe
铜虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1613.1
- 散金: 334
- 红花: 4
- 帖子: 174
- 在线: 67.8小时
- 虫号: 590752
- 注册: 2008-09-01
- 专业: 植物病理学
6楼2015-12-13 14:30:38
Mingle_Su
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 536.7
- 散金: 25
- 帖子: 85
- 在线: 27.9小时
- 虫号: 1311977
- 注册: 2011-05-31
- 性别: GG
- 专业: 头颈部及颌面肿瘤
7楼2015-12-13 17:17:10
mofashishe
铜虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1613.1
- 散金: 334
- 红花: 4
- 帖子: 174
- 在线: 67.8小时
- 虫号: 590752
- 注册: 2008-09-01
- 专业: 植物病理学
Mingle_Su9楼2015-12-13 23:03:10
Mingle_Su
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 536.7
- 散金: 25
- 帖子: 85
- 在线: 27.9小时
- 虫号: 1311977
- 注册: 2011-05-31
- 性别: GG
- 专业: 头颈部及颌面肿瘤
但真的用错没有，FLAG的珠子是黑色的磁珠，HA的珠子是白色的没有磁性的。而且FLAG标签的蛋白在IP后明显富集了。。。 10楼2015-12-13 23:56:09
