24小时热门版块排行榜    

查看: 6076  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Mingle_Su

银虫 (小有名气)

[求助] CoIP/蛋白互作|| 阴性对照杂出条带 ||FLAG HA Triton 洗涤 原生质体瞬时表达 已有2人参与

阴性对照的也被沉淀下来了,一周的实验就这样废了,请各位资深朋友帮分析下原因。每个样品用了20ul带FLAG抗体的磁珠(sigma),孵育结合后用0.1%的Triton 100 洗涤4次,最后用50mM的Tris-HCl pH=7.5 洗涤,每次洗涤均用1mL的buffer。个人觉得应该不是珠子没洗干净,另外考虑蛋白直接结合磁珠,两个完全不相关的蛋白都可以结合磁珠更加不可能。只能想到以上两个比较直接原因,请各位高手指教。 具体问题见下图,谢谢!

CoIP/蛋白互作|| 阴性对照杂出条带 ||FLAG HA Triton 洗涤 原生质体瞬时表达
CoIP
回复此楼
Succeed
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mofashishe

铜虫 (小有名气)

e81那个样品和flag抗体有交叉反应?

发自小木虫Android客户端
3楼2015-12-13 11:37:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mofashishe

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Mingle_Su at 2015-12-13 13:36:18
E81 和 E9 算是两个独立的实验,都出现了同样的问题,交叉反应的可能性应该不大。...

换一种凝胶试试了没?有没做过重复实验啊?从提提质粒开始,

发自小木虫Android客户端
6楼2015-12-13 14:30:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mofashishe

铜虫 (小有名气)

用结合ha的凝胶,还有你是不是把抗体搞错了啊。

发自小木虫Android客户端
8楼2015-12-13 23:01:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mofashishe

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by mofashishe at 2015-12-13 23:01:29
用结合ha的凝胶,还有你是不是把抗体搞错了啊。

你是不是把ha和flag两个抗体弄混了,你上下两个图换换结果就很好了

发自小木虫Android客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

9楼2015-12-13 23:03:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Mingle_Su 的主题更新
信息提示
请填处理意见