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人车

木虫 (正式写手)

[求助] 酵母菌的菌落PCR验证 已有1人参与

这个是我重组酵母的菌落PCR结果 第一条道是直接用含有目的基因的质粒进行的PCR,其他泳道都是用的挑选的重组子进行的菌落PCR
我用的是煮-冻-煮法进行的基因组提取,用的引物是5 AOX1和3AOX1,经过电泳发现,菌落PCR中除了有目标大小的条带外,在500bp左右处出现了一个ppic9k质粒空载的条带
这个就有点想不太通了,希望各位大牛指教,谢谢了~

酵母菌的菌落PCR验证
菌落PCR
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632362481

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 人车 at 2015-11-24 16:12:46
您好,能问以下 如何看出来模版加多的呢?  第一次做没什么经验...

sorry,我看错了,我觉得是不是质粒不纯造成的啊?
。。。
4楼2015-11-24 16:34:10
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632362481

铜虫 (小有名气)

明显模板加多了。
。。。
2楼2015-11-24 15:59:27
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人车

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 632362481 at 2015-11-24 15:59:27
明显模板加多了。

您好,能问以下 如何看出来模版加多的呢?  第一次做没什么经验
3楼2015-11-24 16:12:46
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yangdl1023

木虫 (正式写手)

Panggong

the control without plasmid has a band in PCR? and in our lab we use a kit for whole cell PCR, it is very sample and not need to extract DNA
5楼2015-11-24 17:10:42
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