应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 酵母菌的菌落PCR验证
121/2返回列表12下一页
查看: 3248  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

人车

木虫 (正式写手)

[求助] 酵母菌的菌落PCR验证 已有1人参与

这个是我重组酵母的菌落PCR结果 第一条道是直接用含有目的基因的质粒进行的PCR，其他泳道都是用的挑选的重组子进行的菌落PCR
我用的是煮-冻-煮法进行的基因组提取，用的引物是5 AOX1和3AOX1，经过电泳发现，菌落PCR中除了有目标大小的条带外，在500bp左右处出现了一个ppic9k质粒空载的条带
这个就有点想不太通了，希望各位大牛指教，谢谢了~

酵母菌的菌落PCR验证
菌落PCR
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-11-24 15:57:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

632362481

铜虫 (小有名气)
明显模板加多了。
回复此楼
。。。
2楼2015-11-24 15:59:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

人车

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 632362481 at 2015-11-24 15:59:27
明显模板加多了。

您好，能问以下 如何看出来模版加多的呢？  第一次做没什么经验
赞一下 回复此楼
3楼2015-11-24 16:12:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

632362481

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 人车 at 2015-11-24 16:12:46
您好，能问以下 如何看出来模版加多的呢？  第一次做没什么经验...

sorry,我看错了，我觉得是不是质粒不纯造成的啊？
赞一下 回复此楼
。。。
4楼2015-11-24 16:34:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangdl1023

木虫 (正式写手)

Panggong
the control without plasmid has a band in PCR? and in our lab we use a kit for whole cell PCR, it is very sample and not need to extract DNA
赞一下 回复此楼
5楼2015-11-24 17:10:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

人车

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 632362481 at 2015-11-24 16:34:10
sorry,我看错了，我觉得是不是质粒不纯造成的啊？...

你说的是那个质粒不纯呢？ 我第一个是质粒PCR的 其他的都是菌落PCR
赞一下 回复此楼
6楼2015-11-24 22:34:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

人车

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by yangdl1023 at 2015-11-24 17:10:42
the control without plasmid has a band in PCR? and in our lab we use a kit for whole cell PCR, it is very sample and not need to extract DNA

这就是一种快速检测的方法 不过就是想知道500bp左右的那个条带是为什么
赞一下 回复此楼
7楼2015-11-24 22:35:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沐枫之城

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议楼主以后电泳时候加Marker并且一定要加阳性和阴性对照，还有尽量让图片清晰一点。
根据这个图不明白楼主什么意思。
赞一下 回复此楼
8楼2015-11-25 20:00:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wyfdgg

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by yangdl1023 at 2015-11-24 17:10:42
the control without plasmid has a band in PCR? and in our lab we use a kit for whole cell PCR, it is very sample and not need to extract DNA

can you tell me where can I buy  the kits
赞一下 回复此楼
9楼2015-11-30 17:05:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落雪6

铁杆木虫 (正式写手)

小兵
看看说明书就明白了，用通用引物本来就应该扩出的目的条带本应该比你的目的条带大490多，空载体自然就有一条490多的条带了，建议好好看看毕赤酵母表达手册！

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2015-11-30 17:41:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 人车 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭