24小时热门版块排行榜    

查看: 1660  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

蜗牛先生吃葱

银虫 (小有名气)

[求助] 蛋白的原核表达 已有3人参与

各位同学好,我构建了一个pet21b的原核表达载体,成功构建后通过了PCR和酶切鉴定,并测序无误,经过热激法将构建好的pet21b 的载体质粒转入表达菌株 E.coli BL21(DE3),通过IPTG诱导目的蛋白表达,但是不管我怎么尝试表达条件(温度,IPTG浓度,转速),都不能得到想要的目的蛋白,想知道在诱导表达过程中有哪些我没注意到的地方?

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

蜗牛先生学生物
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冰城'若雪

新虫 (初入文坛)

你好,请问你现在解决了这个问题?

发自小木虫Android客户端
5楼2015-12-09 10:54:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果诱导条件已经尝试过很多,都不表达,也许该载体或菌种并不适合该蛋白表达,可以尝试更换载体或菌种
2楼2015-11-23 09:41:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
从菌种开始赛选,首先提质粒测序看你的序列有没有问题,可以尝试换个载体试试。还有诱导剂添加时间,这个也是很关键的。祝顺利
3楼2015-11-23 14:04:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zouzhengzhong

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

培养时加点氯霉素,同时尝试不同OD值时加入IPTG,诱导不同时间,温度尽量低温。
4楼2015-11-25 08:40:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿天大材料与化工(085600)总分338 +4 蔡大美女 2026-03-13 4/200 2026-03-18 22:47 by walc
[考研] 354求调剂 +4 Tyoumou 2026-03-18 7/350 2026-03-18 21:45 by Tyoumou
[考研] 344求调剂 +6 knight344 2026-03-16 7/350 2026-03-18 20:13 by walc
[考研] 085601专硕,总分342求调剂,地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考研] 311求调剂 +6 26研0 2026-03-15 6/300 2026-03-18 14:43 by haxia
[考研] 材料专硕274一志愿陕西师范大学求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-13 6/300 2026-03-18 14:14 by 脱颖而出
[考研] 331求调剂(0703有机化学 +7 ZY-05 2026-03-13 8/400 2026-03-18 14:13 by 007_lilei
[考博] 环境领域全国重点实验室招收博士1-2名 +3 QGZDSYS 2026-03-13 5/250 2026-03-18 11:13 by QGZDSYS
[考研] 268求调剂 +8 一定有学上- 2026-03-14 9/450 2026-03-17 17:47 by laoshidan
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
[考研] 285化工学硕求调剂(081700) +9 柴郡猫_ 2026-03-12 9/450 2026-03-17 10:18 by Sammy2
[基金申请] 国自科面上基金字体 +6 iwuli 2026-03-12 7/350 2026-03-16 21:18 by sculhf
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 5/250 2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
信息提示
请填处理意见