应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 蛋白的原核表达
61/1返回列表
查看: 1701  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

蜗牛先生吃葱

银虫 (小有名气)

[求助] 蛋白的原核表达 已有3人参与

各位同学好，我构建了一个pet21b的原核表达载体，成功构建后通过了PCR和酶切鉴定，并测序无误，经过热激法将构建好的pet21b 的载体质粒转入表达菌株 E.coli BL21（DE3），通过IPTG诱导目的蛋白表达，但是不管我怎么尝试表达条件（温度，IPTG浓度，转速），都不能得到想要的目的蛋白，想知道在诱导表达过程中有哪些我没注意到的地方？

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
蜗牛先生学生物
1楼 2015-11-20 19:27:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果诱导条件已经尝试过很多，都不表达，也许该载体或菌种并不适合该蛋白表达，可以尝试更换载体或菌种
赞一下 回复此楼
2楼2015-11-23 09:41:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
从菌种开始赛选，首先提质粒测序看你的序列有没有问题，可以尝试换个载体试试。还有诱导剂添加时间，这个也是很关键的。祝顺利
赞一下 回复此楼
3楼2015-11-23 14:04:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zouzhengzhong

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

培养时加点氯霉素，同时尝试不同OD值时加入IPTG，诱导不同时间，温度尽量低温。
赞一下 回复此楼
4楼2015-11-25 08:40:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冰城＇若雪

新虫 (初入文坛)
你好，请问你现在解决了这个问题？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2015-12-09 10:54:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (职业作家)
优化密码子把，不然不好做

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2015-12-09 13:38:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蜗牛先生吃葱 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085404 293求调剂 +3 勇远库爱314 2026-04-08 3/150 2026-04-09 04:24 by 孙小小12457
[考研] 0703调剂，一志愿天津大学319分 +23 haaaabcd 2026-04-05 26/1300 2026-04-08 16:19 by luoyongfeng
[考研] 298求调剂 +4 残荷新柳 2026-04-07 4/200 2026-04-07 23:02 by lbsjt
[考研] 农学，求调剂，314分 +4 访客记录可爱 2026-04-04 4/200 2026-04-07 21:07 by 等岸
[考研] 338求调剂 +4 我想上岸ii 2026-04-05 4/200 2026-04-06 21:04 by 木子君1218
[考研] 308求调剂 +3 终不似从前 2026-04-05 3/150 2026-04-05 22:23 by hemengdong
[考研] 08专硕275调剂 +5 AaAa7420 2026-04-05 5/250 2026-04-05 18:01 by jkddd
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358求调剂 +6 cs0106 2026-04-05 6/300 2026-04-05 16:34 by imissbao
[考研] 328分调剂 +6 门men 2026-04-04 6/300 2026-04-05 13:40 by imissbao
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +6 ioodiiij 2026-04-04 6/300 2026-04-05 10:09 by guoweigw
[考研] 可跨专业调剂 +3 周的得地 2026-04-04 6/300 2026-04-04 22:21 by barlinike
[考研] 调剂 +9 19945159693 2026-04-03 10/500 2026-04-04 20:16 by dongzh2009
[考研] 一志愿南农090401，268，求调剂 +5 一木鸟然 2026-04-04 5/250 2026-04-04 17:07 by babysonlkd
[考研] 材料调剂 +11 吴棂颖！ 2026-04-03 11/550 2026-04-04 09:56 by 小小树2024
[考研] 兽医调剂 +3 wh119216 2026-04-02 3/150 2026-04-03 19:34 by zrongyan
[考研] 274求调剂 +9 顺理成张 2026-04-03 10/500 2026-04-03 15:10 by 啊俊！
[考研] 生物学硕341求调剂 +4 你笑起来像云朵 2026-04-03 4/200 2026-04-03 10:32 by macy2011
[考研] 考研调剂 +3 李木子0120 2026-04-02 5/250 2026-04-02 21:45 by dongzh2009
[考研] 296求调剂 +4 sdhu 2026-04-02 4/200 2026-04-02 21:29 by baoball
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +3 cs0106 2026-04-02 5/250 2026-04-02 11:37 by olim
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭