24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1695  |  回复: 5

蜗牛先生吃葱

银虫 (小有名气)

[求助] 蛋白的原核表达 已有3人参与

各位同学好,我构建了一个pet21b的原核表达载体,成功构建后通过了PCR和酶切鉴定,并测序无误,经过热激法将构建好的pet21b 的载体质粒转入表达菌株 E.coli BL21(DE3),通过IPTG诱导目的蛋白表达,但是不管我怎么尝试表达条件(温度,IPTG浓度,转速),都不能得到想要的目的蛋白,想知道在诱导表达过程中有哪些我没注意到的地方?

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

蜗牛先生学生物
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果诱导条件已经尝试过很多,都不表达,也许该载体或菌种并不适合该蛋白表达,可以尝试更换载体或菌种
2楼2015-11-23 09:41:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
从菌种开始赛选,首先提质粒测序看你的序列有没有问题,可以尝试换个载体试试。还有诱导剂添加时间,这个也是很关键的。祝顺利
3楼2015-11-23 14:04:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zouzhengzhong

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

培养时加点氯霉素,同时尝试不同OD值时加入IPTG,诱导不同时间,温度尽量低温。
4楼2015-11-25 08:40:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冰城'若雪

新虫 (初入文坛)

你好,请问你现在解决了这个问题?

发自小木虫Android客户端
5楼2015-12-09 10:54:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (职业作家)


优化密码子把,不然不好做

发自小木虫Android客户端
6楼2015-12-09 13:38:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蜗牛先生吃葱 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料调剂 +13 一样YWY 2026-04-06 13/650 2026-04-08 20:44 by LiuXingYu星星
[考研] 328求调剂 +16 lftmya 2026-04-07 17/850 2026-04-08 18:45 by 环化材-小生
[考研] 288求调剂,一志愿华南理工大学071005 +11 ioodiiij 2026-04-08 11/550 2026-04-08 16:48 by tjzhao
[考研] 0703调剂,一志愿天津大学319分 +23 haaaabcd 2026-04-05 26/1300 2026-04-08 16:19 by luoyongfeng
[考研] 315求调剂 +17 欣喜777 2026-04-04 18/900 2026-04-08 13:54 by hangsimei
[考研] 求调剂 +6 吃口冰激凌 2026-04-07 6/300 2026-04-08 01:41 by Linzejun
[考研] 288求调剂 +12 没有答案_ 2026-04-05 12/600 2026-04-08 00:17 by T可可西里T
[考研] 085404 293求调剂 +8 勇远库爱314 2026-04-06 9/450 2026-04-07 13:05 by flydream1314
[论文投稿] Decision: Revise for Editor还会送审吗 100+3 CccccccccFD 2026-04-04 5/250 2026-04-07 10:58 by 北京莱茵润色
[考研] 软工学硕299求调剂 +6 useryy 2026-04-07 6/300 2026-04-07 09:50 by vgtyfty
[考研] 求调剂 +11 xzghyuj 2026-04-04 11/550 2026-04-06 11:49 by lijunpoly
[考研] 288求调剂,一志愿华南理工大学071005 +6 ioodiiij 2026-04-04 6/300 2026-04-05 10:09 by guoweigw
[考研] 一志愿江南大学085501机械工程专硕326分,本科佳木斯大学 +5 顾若浮生 2026-04-03 9/450 2026-04-05 09:57 by 1753564080
[考研] 一志愿北京化工大学,初试成绩350求调剂 +9 沿岸?贝壳 2026-04-04 14/700 2026-04-05 01:09 by 沿岸?贝壳
[考研] 282电子信息0854专硕调剂 +4 202451007219 2026-04-02 6/300 2026-04-04 21:55 by laoshidan
[考研] 283分求调剂 +7 小聂爱学习 2026-04-03 7/350 2026-04-04 21:51 by hemengdong
[考研] 调剂 +9 19945159693 2026-04-03 10/500 2026-04-04 20:16 by dongzh2009
[考研] 348分环境工程·调剂 +10 吴彦祖24k 2026-04-03 11/550 2026-04-04 14:19 by 无际的草原
[考研] 289-求调剂 +4 这里是_ 2026-04-03 4/200 2026-04-03 14:23 by 1753564080
[考研] 一志愿安徽大学计算机科学与技术学硕,331分求调剂 +5 蒋昌鹏qtj 2026-04-01 5/250 2026-04-02 08:10 by fxue1114
信息提示
请填处理意见