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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » TA克隆转化DH5α细胞后，涂板有菌落生长，但是挑斑之后摇菌怎么也摇不起来，
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瑷洱yd

金虫 (小有名气)

[求助] TA克隆转化DH5α细胞后，涂板有菌落生长，但是挑斑之后摇菌怎么也摇不起来， 已有6人参与

TA克隆转化DH5α细胞后，涂板有菌落生长，但是挑斑之后，在1.5ML离心管中，加入1ML LB 和1微升AMP,摇菌怎么也摇不起来，（已经尝试了11几个平板，挑了无数的菌落，但是都没有摇起来）37度，200转，摇过夜之后依旧澄清。
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1楼 2015-11-13 19:54:57
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

1977452216

木虫 (著名写手)

天可汗
内容已删除
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天道酬勤
13楼2015-11-16 21:14:44
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刘氏响声丸

铁虫 (小有名气)
重新配板，保险起见一起把LB／amp一起配出来

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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14楼2015-11-17 08:55:23
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heianduck

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
瑷洱yd: 金币+2, ★有帮助 2015-11-19 13:31:49
你这个平板是才配制的？不是的话放多久了啊？可以尝试先加300~400ul培养基，摇几个小时后，再取200ul转接到1ML培养基里面。
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23楼2015-11-18 14:40:25
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普通回帖

铿锵爪神

金虫 (正式写手)
楼主用离心管摇啊？！

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2楼2015-11-13 23:13:55
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铿锵爪神

金虫 (正式写手)
不是用

发自小木虫Android客户端
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3楼2015-11-13 23:14:12
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铿锵爪神

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 铿锵爪神 at 2015-11-13 23:14:12
不是用

试管吗？

发自小木虫Android客户端
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4楼2015-11-13 23:14:26
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瑷洱yd

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 铿锵爪神 at 2015-11-13 23:13:55
楼主用离心管摇啊？！

是用离心管的，因为太多了，没有那么多的试管。
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5楼2015-11-14 17:44:20
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铿锵爪神

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
离心管太小摇不起来吧？！你确定实验室其他人以前是用离心管摇的？

发自小木虫Android客户端
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6楼2015-11-14 22:09:19
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51mimi

新虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-11-14 22:55:26
不管用不用试管，都不可能摇不起来，要检查板子的抗性有没有失效，中间过程有没有污染。先做一个菌落PCR验证，如果是阳性，建议你注意各步骤的污染问题。

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7楼2015-11-14 22:13:04
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here0009

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
目测平板放太久，抗生素失效了
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Forthemoon
8楼2015-11-16 09:54:23
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瑷洱yd

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by here0009 at 2015-11-16 09:54:23
目测平板放太久，抗生素失效了

不会吧，刚过夜培养的平板诶，早上就去挑斑的，这不久吧？
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9楼2015-11-16 17:49:33
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瑷洱yd

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 铿锵爪神 at 2015-11-14 22:09:19
离心管太小摇不起来吧？！你确定实验室其他人以前是用离心管摇的？

离心管是可以的，之前实验室一直都是这样做的啊。
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10楼2015-11-16 17:50:44
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