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Q-PCR双峰
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weide12
银虫
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Q-PCR双峰
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同一批样品扩增4个基因,一个溶解曲线为单峰,其余有双峰,GAPDH熔解曲线也不好,请高手帮忙看看是什么原因。
GAPDH.jpg
IL-1β.jpg
MCP1.jpg
TNFα.jpg
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1楼
2015-11-07 19:56:19
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cy0726
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7楼
:
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银树苍穹
at 2015-11-09 08:01:56
GAPDH看着还行吧,可能引物有降解,导致峰有少许偏差,通用的序列应该没有问题。最后一个可以的,其他的重新设计引物,仅供参考。
如果不加引物也能有融解曲线就一定说明引物有二聚体吗?
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8楼
2015-11-10 09:16:11
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lylyly2006
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双峰,就是引物设计不好不特异,又有引物二聚体,重新设计引物,primer上面给出的引物一般都会优先没有二聚体的。求金币
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2楼
2015-11-07 23:03:33
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weide12
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2楼
:
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lylyly2006
at 2015-11-07 23:03:33
双峰,就是引物设计不好不特异,又有引物二聚体,重新设计引物,primer上面给出的引物一般都会优先没有二聚体的。求金币
这也太不专业了,引物有问题的话有的样品扩出来又没事
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3楼
2015-11-07 23:33:18
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3楼
:
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weide12
at 2015-11-07 23:33:18
这也太不专业了,引物有问题的话有的样品扩出来又没事...
我不专业,无语了。你基础不好,说了你听不懂,引物特异和样品p出来是什么关系?
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4楼
2015-11-08 22:46:49
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