24小时热门版块排行榜    

查看: 2412  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

weide12

银虫 (小有名气)

[求助] Q-PCR双峰 已有2人参与

同一批样品扩增4个基因,一个溶解曲线为单峰,其余有双峰,GAPDH熔解曲线也不好,请高手帮忙看看是什么原因。

Q-PCR双峰
GAPDH.jpg


Q-PCR双峰-1
IL-1β.jpg


Q-PCR双峰-2
MCP1.jpg


Q-PCR双峰-3
TNFα.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

银树苍穹

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
GAPDH看着还行吧,可能引物有降解,导致峰有少许偏差,通用的序列应该没有问题。最后一个可以的,其他的重新设计引物,仅供参考。

发自小木虫Android客户端
7楼2015-11-09 08:01:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lylyly2006

木虫 (正式写手)

双峰,就是引物设计不好不特异,又有引物二聚体,重新设计引物,primer上面给出的引物一般都会优先没有二聚体的。求金币

发自小木虫IOS客户端
2楼2015-11-07 23:03:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weide12

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lylyly2006 at 2015-11-07 23:03:33
双峰,就是引物设计不好不特异,又有引物二聚体,重新设计引物,primer上面给出的引物一般都会优先没有二聚体的。求金币

这也太不专业了,引物有问题的话有的样品扩出来又没事
3楼2015-11-07 23:33:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lylyly2006

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by weide12 at 2015-11-07 23:33:18
这也太不专业了,引物有问题的话有的样品扩出来又没事...

我不专业,无语了。你基础不好,说了你听不懂,引物特异和样品p出来是什么关系?

发自小木虫IOS客户端
4楼2015-11-08 22:46:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见