24小时热门版块排行榜    

查看: 1045  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

846031273

铜虫 (小有名气)

[求助] WB检测多抗 已有2人参与

亲们,我合成了一个多抗现在用WB检测,从真核里面杂不出条带,要么就是模糊的一片;后来试用了ProteinA拉,一部分染色,一部分用多抗杂,结果染色的很明显,条带也很单一,但是杂的反而没有,一显色背景都变成了黄色的。不知道这是不是因为上样有点多?按理说ProteinA拉的染色结果不错的话,应该能杂出条带的。多抗我是按照1:100加的,不知是不是多抗太少了。准备减少下上样量并做个多抗梯度看看
     大家有没有遇到类似问题的,是怎么解决的呢?请求帮助
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

846031273

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by MBB-787 at 2015-11-05 08:45:34
你的材料是什么?可以点个正对照或Marker试试,还有可能是你的抗体加多了。

我做的是玉米,现在看你们的分析可能真是抗体加多了,我再检测个抗体梯度看看
5楼2015-11-07 23:17:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

yorkwallace

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
846031273: 金币+5, 有帮助 2015-11-07 23:21:06
你的意思是你的背景杂吗?多抗1:100稀释太高了,我一般是1:10000,你到底是做WB是在做COIP呀(我看到ProteinA)
2楼2015-11-05 08:37:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MBB-787

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
846031273: 金币+5, 有帮助 2015-11-07 23:21:23
你的材料是什么?可以点个正对照或Marker试试,还有可能是你的抗体加多了。

发自小木虫Android客户端
3楼2015-11-05 08:45:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

846031273

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yorkwallace at 2015-11-05 08:37:07
你的意思是你的背景杂吗?多抗1:100稀释太高了,我一般是1:10000,你到底是做WB是在做COIP呀(我看到ProteinA)

难道是多抗太多了?我刚刚做了个蛋白上样量的梯度,依然没有杂出东西来;但是跟我一起做抗体的同学他做了多抗梯度,也是没有条带。您看,这是我今晚刚显色的结果,唉……
看来不是蛋白上样量的原因啊
我是做WB,用的是原核表达的蛋白;用ProteinA的是从真核植株里面拉的
WB检测多抗
IMG_20151107_225734.jpg

4楼2015-11-07 23:16:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料,材料加工与模拟招收大量调剂】 +3 Higraduate 2026-03-22 6/300 2026-03-24 09:55 by AZMK
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[考研] 299求调剂 +5 某某某某位 2026-03-21 5/250 2026-03-23 23:36 by 热情沙漠
[考研] 327求调剂 +5 prayer13 2026-03-23 5/250 2026-03-23 22:11 by 星空星月
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境,总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 0854电子信息求调剂 +3 α____ 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:28 by zhq0425
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[考研] 318求调剂 +4 plum李子 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:17 by ColorlessPI
[考研] 化学调剂 +5 yzysaa 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:12 by peike
[考研] 考研调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 材料工程(专)一志愿985 初试335求调剂 +3 hiloiy 2026-03-17 4/200 2026-03-21 03:04 by JourneyLucky
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 353求调剂 +3 拉钩不许变 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:56 by JourneyLucky
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[论文投稿] 申请回稿延期一个月,编辑同意了。但系统上的时间没变,给编辑又写邮件了,没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 288求调剂,一志愿华南理工大学071005 +5 ioodiiij 2026-03-17 5/250 2026-03-19 18:22 by zcl123
[考研] 【同济软件】软件(085405)考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
信息提示
请填处理意见