24小时热门版块排行榜    

查看: 1047  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

846031273

铜虫 (小有名气)

[求助] WB检测多抗 已有2人参与

亲们,我合成了一个多抗现在用WB检测,从真核里面杂不出条带,要么就是模糊的一片;后来试用了ProteinA拉,一部分染色,一部分用多抗杂,结果染色的很明显,条带也很单一,但是杂的反而没有,一显色背景都变成了黄色的。不知道这是不是因为上样有点多?按理说ProteinA拉的染色结果不错的话,应该能杂出条带的。多抗我是按照1:100加的,不知是不是多抗太少了。准备减少下上样量并做个多抗梯度看看
     大家有没有遇到类似问题的,是怎么解决的呢?请求帮助
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

846031273

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by MBB-787 at 2015-11-05 08:45:34
你的材料是什么?可以点个正对照或Marker试试,还有可能是你的抗体加多了。

我做的是玉米,现在看你们的分析可能真是抗体加多了,我再检测个抗体梯度看看
5楼2015-11-07 23:17:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

yorkwallace

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
846031273: 金币+5, 有帮助 2015-11-07 23:21:06
你的意思是你的背景杂吗?多抗1:100稀释太高了,我一般是1:10000,你到底是做WB是在做COIP呀(我看到ProteinA)
2楼2015-11-05 08:37:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MBB-787

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
846031273: 金币+5, 有帮助 2015-11-07 23:21:23
你的材料是什么?可以点个正对照或Marker试试,还有可能是你的抗体加多了。

发自小木虫Android客户端
3楼2015-11-05 08:45:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

846031273

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yorkwallace at 2015-11-05 08:37:07
你的意思是你的背景杂吗?多抗1:100稀释太高了,我一般是1:10000,你到底是做WB是在做COIP呀(我看到ProteinA)

难道是多抗太多了?我刚刚做了个蛋白上样量的梯度,依然没有杂出东西来;但是跟我一起做抗体的同学他做了多抗梯度,也是没有条带。您看,这是我今晚刚显色的结果,唉……
看来不是蛋白上样量的原因啊
我是做WB,用的是原核表达的蛋白;用ProteinA的是从真核植株里面拉的
WB检测多抗
IMG_20151107_225734.jpg

4楼2015-11-07 23:16:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 299求调剂 +6 某某某某位 2026-03-21 6/300 2026-03-24 12:22 by 544594351
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +5 NIFFFfff 2026-03-20 5/250 2026-03-24 11:46 by 544594351
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +18 chaojifeixia 2026-03-19 20/1000 2026-03-24 10:34 by dolphin_ycj
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 291求调剂 +8 hhhhxn.. 2026-03-23 8/400 2026-03-23 23:15 by peike
[考研] 材料/农业专业,07/08开头均可,过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪!?!
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 6/300 2026-03-23 21:45 by 子系博
[考研] 材料专硕英一数二306 +8 z1z2z3879 2026-03-18 8/400 2026-03-23 20:49 by baobaoye
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +8 tcxiaoxx 2026-03-20 9/450 2026-03-23 12:16 by tcxiaoxx
[考研] 280求调剂 +11 咕噜晓晓 2026-03-18 12/600 2026-03-21 22:40 by ACS Nano——
[考研] 化学调剂 +5 yzysaa 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:12 by peike
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 华东师范大学-071000生物学-293分-求调剂 +3 研究生何瑶明 2026-03-18 3/150 2026-03-21 01:30 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
信息提示
请填处理意见