应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » WB检测多抗
51/1返回列表
查看: 1141  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

846031273

铜虫 (小有名气)

[求助] WB检测多抗 已有2人参与

亲们，我合成了一个多抗现在用WB检测，从真核里面杂不出条带，要么就是模糊的一片；后来试用了ProteinA拉，一部分染色，一部分用多抗杂，结果染色的很明显，条带也很单一，但是杂的反而没有，一显色背景都变成了黄色的。不知道这是不是因为上样有点多？按理说ProteinA拉的染色结果不错的话，应该能杂出条带的。多抗我是按照1:100加的，不知是不是多抗太少了。准备减少下上样量并做个多抗梯度看看
     大家有没有遇到类似问题的，是怎么解决的呢？请求帮助
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-11-04 21:50:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yorkwallace

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
846031273: 金币+5, ★有帮助 2015-11-07 23:21:06
你的意思是你的背景杂吗？多抗1:100稀释太高了，我一般是1：10000，你到底是做WB是在做COIP呀（我看到ProteinA）
赞一下 回复此楼
2楼2015-11-05 08:37:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MBB-787

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
846031273: 金币+5, ★有帮助 2015-11-07 23:21:23
你的材料是什么？可以点个正对照或Marker试试，还有可能是你的抗体加多了。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2015-11-05 08:45:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

846031273

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yorkwallace at 2015-11-05 08:37:07
你的意思是你的背景杂吗？多抗1:100稀释太高了，我一般是1：10000，你到底是做WB是在做COIP呀（我看到ProteinA）

难道是多抗太多了？我刚刚做了个蛋白上样量的梯度，依然没有杂出东西来；但是跟我一起做抗体的同学他做了多抗梯度，也是没有条带。您看，这是我今晚刚显色的结果，唉……
看来不是蛋白上样量的原因啊
我是做WB，用的是原核表达的蛋白；用ProteinA的是从真核植株里面拉的
WB检测多抗
IMG_20151107_225734.jpg
赞一下 回复此楼
4楼2015-11-07 23:16:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

846031273

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by MBB-787 at 2015-11-05 08:45:34
你的材料是什么？可以点个正对照或Marker试试，还有可能是你的抗体加多了。

我做的是玉米，现在看你们的分析可能真是抗体加多了，我再检测个抗体梯度看看
赞一下 回复此楼
5楼2015-11-07 23:17:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 846031273 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] filecode +11 documentary 2026-08-10 12/600 2026-08-12 12:42 by kudofaye
[基金申请] 不应该看fileCode +4 且听虎啸 2026-08-12 4/200 2026-08-12 12:40 by 行无人
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +20 Lanmanbaby 2026-08-09 33/1650 2026-08-12 11:26 by lantianda
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +5 Tide man 2026-08-11 5/250 2026-08-12 09:24 by kangban
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭