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WB检测多抗 已有2人参与
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亲们，我合成了一个多抗现在用WB检测，从真核里面杂不出条带，要么就是模糊的一片；后来试用了ProteinA拉，一部分染色，一部分用多抗杂，结果染色的很明显，条带也很单一，但是杂的反而没有，一显色背景都变成了黄色的。不知道这是不是因为上样有点多？按理说ProteinA拉的染色结果不错的话，应该能杂出条带的。多抗我是按照1:100加的，不知是不是多抗太少了。准备减少下上样量并做个多抗梯度看看 大家有没有遇到类似问题的，是怎么解决的呢？请求帮助 |
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yorkwallace
银虫 (小有名气)
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2楼2015-11-05 08:37:07
【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
846031273: 金币+5, ★有帮助 2015-11-07 23:21:23
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846031273: 金币+5, ★有帮助 2015-11-07 23:21:23
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你的材料是什么？可以点个正对照或Marker试试，还有可能是你的抗体加多了。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2015-11-05 08:45:34
难道是多抗太多了？我刚刚做了个蛋白上样量的梯度，依然没有杂出东西来；但是跟我一起做抗体的同学他做了多抗梯度，也是没有条带。您看，这是我今晚刚显色的结果，唉……
4楼2015-11-07 23:16:43
5楼2015-11-07 23:17:42