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酶解缓冲液及酶解过程中pH如何控制 已有3人参与
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用碱性蛋白酶酶解，该酶的最适pH为8.5，需要pH8.5的缓冲液，有如下几个问题： 1)碱性缓冲液有硼酸-硼砂缓冲液，tris-盐酸缓冲液符合8.5的pH要求，这两种缓冲液都可以么？对产物的活性哪个影响小一点？ 2)如果要比较不同pH条件下酶解产物的活性，如pH8.5,9,9.5，前两种缓冲液可以用硼酸-硼砂缓冲液，但是该缓冲液达不到9.5的要求，那用硼砂-氢氧化钠缓冲液来配置，会有影响么？ 3)酶解过程中要始终保持某一pH不变，文献里说要加入1mol/L的氢氧化钠始终保持起始pH，这个如何操作？是在酶解过程中不停地测定pH么？ 4)酶解过程需要一直搅拌么？ |
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【答案】应助回帖
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1）不同的物质对应最适缓冲液也不一样，你的问题别人无法给你确定的解答，这个你自己试验下不就完事了么，事实大于雄辩。 2）用氢氧化钠的缓冲液，行不行先试验。多动手。 3）酶反应过程控制PH的方式有很多，补碱或补酸，怎么补，看你的实验条件，反应釜自带PH计，有自动控制流加酸碱的蠕动泵，要么小实验就把PH开着放进反应溶液中，随时观察，随时调节。 4）当然需要一直搅拌。哎，小朋友多试验。祝顺利。 |
2楼2015-11-05 09:17:49
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