应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 双酶切鉴定
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
221/3返回列表123下一页
查看: 2273  |  回复: 21
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

宁静致远131

金虫 (正式写手)

[交流] 双酶切鉴定

转DH5a后，菌液浑浊正常，菌液PCR鉴定显示有目的基因条带，然而双酶切鉴定的时候为什么没有目的条带，只有最上边的条带，重复几次未果，想知道摇起来的菌是什么东西？
回复此楼

» 猜你喜欢
天道酬勤
1楼 2015-10-31 10:45:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mcxiaomu1023

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
同是沦落人啊~！我这几天也是在做双酶切鉴定，跟楼主一样，也是酶切后跑胶没有目的条带，只有最边上的质粒条带，酶切体系也优化过，跑胶电压也调节过，做了N次还是没有。楼主的目的片段多大？以后多多交流啊~
赞一下 回复此楼
2楼2015-11-01 09:17:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangronglu

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
宁静致远131: 金币+3 2015-11-08 07:30:49
这个存在以下情况：1，转基因的大肠杆菌是否阳性，经菌液pcr鉴定，阳性方可酶切。2，提取的质粒是否有问题，譬如震荡剧烈，断裂之类的。3，酶切位点要合适确认是否正确，此外还需考虑双酶切两个酶的酶切效率，若还是不行可以使用单酶切，分两步进行。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
努力就有收获，人人都能成功
3楼2015-11-01 10:16:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rogerqiu

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这种情况说明没有酶切开，可以直接提取质粒送去测序，再比对就行了，毕竟是鉴定不需要执着酶切一种办法。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
既来之，则安之
4楼2015-11-01 11:36:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

145457367

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by jiangronglu at 2015-11-01 10:16:31
这个存在以下情况：1，转基因的大肠杆菌是否阳性，经菌液pcr鉴定，阳性方可酶切。2，提取的质粒是否有问题，譬如震荡剧烈，断裂之类的。3，酶切位点要合适确认是否正确，此外还需考虑双酶切两个酶的酶切效率，若还是 ...

菌液PCR有出现目的条带，而双酶切无条带，一片空白。把菌液拿去测序用的是通用引物测是失败的测序状态。如何解？
赞一下 回复此楼
5楼2015-11-01 11:44:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风过云动
祝福

发自小木虫Android客户端
6楼2015-11-01 11:59:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

marlyn
祝福

发自小木虫Android客户端
7楼2015-11-01 12:06:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sonny

金虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你有阴性对照吗，也不上张图，谁知道你实验有没有污染，PCR本生就易污染，造成假阳性，没对照还讨论什么

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2015-11-01 12:10:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
祝福楼主，舔舔开心，日日健康。
赞一下 回复此楼
9楼2015-11-01 12:12:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangronglu

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 145457367 at 2015-11-01 11:44:16
菌液PCR有出现目的条带，而双酶切无条带，一片空白。把菌液拿去测序用的是通用引物测是失败的测序状态。如何解？...

这个是你选择的酶切位点有问题，中间可能有错配。最后合适双酶切的两个酶是否为同位酶。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
努力就有收获，人人都能成功
10楼2015-11-01 13:26:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 宁静致远131 的主题更新
221/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 安徽大学专硕生物与医药专业(086000)324分，英语已过四六级，六级521，求调剂 +3 美味可乐鸡翅 2026-03-26 3/150 2026-03-27 08:46 by hxsm
[考研] 一志愿郑大085600，310分求调剂 +4 李潇可 2026-03-26 4/200 2026-03-27 08:12 by hypershenger
[考研] 343求调剂 +4 赠我一本书 2026-03-23 4/200 2026-03-27 00:40 by wxiongid
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +6 谷雨上岸 2026-03-23 7/350 2026-03-26 18:55 by 不吃魚的貓
[考研] 考研调剂 +8 小蜡新笔 2026-03-26 8/400 2026-03-26 16:18 by dick_runner
[考研] 299求调剂 +7 某某某某位 2026-03-21 8/400 2026-03-25 20:34 by 热情沙漠
[考研] 296求调剂 +4 汪！？！ 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪！？！
[考研] 085600材料与化工调剂 +9 A-哆啦Z梦 2026-03-23 15/750 2026-03-25 11:18 by Ainin_
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:46 by ColorlessPI
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭