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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 一个质粒能表达两个蛋白吗？不是融合蛋白
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liuxinyueer

木虫 (正式写手)

[交流] 一个质粒能表达两个蛋白吗？不是融合蛋白 已有14人参与

我第一个蛋白后有TAA终止密码子，之后又连着第二个蛋白的ATG，这样能一个质粒表达两个蛋白吗？
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ocean_of_yu

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1楼 2015-10-10 21:11:03
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sonny

金虫 (著名写手)
★
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当然可以，最好是用双启动子的，这样两个基因的拷贝数基本一致，表达相对平衡。而在单启动子基因下游插入IRES会使IRES下游的基因表达效率相对较低。建议用双启动子的质粒！
E.coli. ：pETDuet-1 vector
哺乳动物细胞: pBudCE4.1 vector

希望对你有帮助！

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5楼2015-10-11 10:27:15
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勤奋的工人

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
还真不好说。即使能表达两个蛋白又能怎样？没有说服力～非要的话，就一个质粒上两个启动子

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2楼2015-10-10 21:27:41
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普通回帖

小小cool

金虫 (正式写手)
不能的，

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3楼2015-10-10 21:34:56
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小小cool

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
双启动子或者是哺乳细胞加ires或t2a

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2015-10-11 09:22:00
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wang0371

铁虫 (小有名气)
★
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你需要把第一个基因的终止密码子序列去掉

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基于青睐有准备的人
6楼2015-10-11 12:04:05
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evil丶zero

金虫 (小有名气)
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引用回帖:
6楼: Originally posted by wang0371 at 2015-10-11 12:04:05
你需要把第一个基因的终止密码子序列去掉

这样不就是融合蛋白了？
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7楼2015-10-12 08:30:02
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wang0371

铁虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
7楼: Originally posted by evil丶zero at 2015-10-11 12:30:02
这样不就是融合蛋白了？...

是的，还有个问题我比较纠结，就是两个蛋白之间是不是要加一个linker，你是怎么做的啊

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基于青睐有准备的人
8楼2015-10-12 12:12:49
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Eternity宇

禁虫 (著名写手)
★
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本帖内容被屏蔽
9楼2015-10-12 14:28:59
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evil丶zero

金虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
8楼: Originally posted by wang0371 at 2015-10-12 12:12:49
是的，还有个问题我比较纠结，就是两个蛋白之间是不是要加一个linker，你是怎么做的啊
...

我没做过。个人觉得，好像是要加一个蛋白酶切割位点，像胞外表达那样。希望能帮到你。

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10楼2015-10-12 17:01:01
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