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关于外源质粒重组和转座DH10-MultiBac杆状病毒表达系统,表达蛋白,求助!! 已有1人参与
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| 目前用DH10-MultiBac杆状病毒表达系统,表达多个外源基因。外源基因我分别用了两个质粒装载,分别用A和B表示吧,其中一个质粒(A)通过T7n转座到MultiBac,另外的一个质粒(B)通过LoxP位点重组到MultiBac上,原理是这个原理。可是实际做的时候发现,将A质粒单独转化到DH10-MultiBac感受态细胞中,通过T7n转座,进行蓝白斑挑选,挑出来的白斑也能P出300带。单独转化B质粒到DH10-MultiBac感受态细胞中,没有长菌斑。要是同时将A和B质粒同时转化DH10-MultiBac感受态细胞,压根一个菌斑也没有!!来来回回折腾了一个月了,老板催的着急,,,,还请虫友们帮帮忙分析分析哦哦!!!谢谢谢谢谢谢谢啦啊啊啊啊啊 |
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2楼2015-12-30 09:19:38













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