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andywang6137木虫 (著名写手)
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[求助]
最近TA克隆老是失败，请大家分析一下。 已有9人参与
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PCR产物，胶回收后TA克隆，板子总长成这样，请高手分析一下原因。taq酶，宝生物的；胶回收试剂盒，全式金的；T载体，用过生工和全式金的。感受态细胞，全式金和自己制备的。之前还做出来了，上学的时候TA克隆也没出过问题，现在涂的板子老是长成下面图片这样。我自己动手做了一次，2个研究生做了一次都是下面的结果（图1：准备回收的目的片段；图2-4，平板菌液，学生发过来的，忘记那一个是水做的对照）。分析不出来原因，请高手分析一下。谢谢！ 0.jpg  1.jpg  2.jpg  3.jpg |
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【答案】应助回帖
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andywang6137: 金币+10, 感谢帮助 2015-10-08 10:43:43
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个人感觉，一是有可能涂平板菌液浓度过高，二是有可能抗生素失效，三是有可能连接的时候用的目的片段量过高，PCR回收时亮度比maker还亮，就需要减少目的片段样本量…我平常出的问题就这三个…不晓得能不能帮助到你 发自小木虫IOS客户端 |
14楼2015-09-27 23:23:05
chenli1017
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4楼2015-09-25 20:08:16
